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RAW264.7小鼠單核巨噬細胞轉染試劑-AD600025試劑
閱讀：980 發布時間：2022-1-20簡要描述：
RAW264.7小鼠單核巨噬細胞轉染試劑用于哺乳動物細胞、活體動物轉染的 Advanced DNA RNA 第三代多肽小分子轉染試劑，此技術成為新的蛋白功能、免疫細胞及干細胞治療、研發及生產的主要關鍵技術之一。
一、產品說明：
1、產品名稱
Advanced DNA RNA Transfection Reagent
2、包裝規格
貨號：AD600025 、AD600050、AD600075、AD600150
規格：0.25ml、0.5ml、0.75ml、1.5ml
3、儲存條件
常溫運輸，4℃保存，可保存兩年，拒絕反復凍融。
二、RAW264.7小鼠單核巨噬細胞轉染試劑轉染質粒8100bp效果圖和轉染條件
轉染條件
質粒DNA大?。?100bp
培養板：6孔板
轉染試劑用量：6ul
質粒DNA用量：電訊
轉染試劑：Zeta Life Advanced DNA RNA轉染試劑
轉染時間：48小時
血清：Z7010FBS-500澳洲胎牛血清
細胞凍存：CE70100T無血清細胞凍存液
三、RAW264.7小鼠單核巨噬細胞轉染試劑操作步驟：
材料準備
RNA 濃度 20 uM /L
質粒 DNA 濃度 300 ng-2 ug/ul（注意：①溶解于無菌雙蒸水或超純水；②無內毒素 ）
提前 1 天接種細胞：細胞匯合度在 60-80%左右，再進行轉染。
核酸復合物制備：將核酸與轉染試劑按照 1:1 關系直接混合，用移液器吹吸 10-15 次混勻，室溫靜 止 10-15 分鐘。
在細胞培養基中加入核酸復合物：根據參考用量在細胞中加入核酸復合物，并輕輕混勻；細胞培養基 里面可以含有血清。
細胞換液：轉染 24 小時后對細胞進行正常換液，懸浮細胞轉染過程中不用換液。
分析結果：質粒 DNA 轉染 48-72 小時后熒光檢測轉染效率，48-96 小時檢測 mRNA 或蛋白表達。若 進行穩定表達細胞株的篩選，則在轉染后 24-48 小時左右加入適量的藥物進行篩選。siRNA 轉染后 9 小時熒光檢測轉染效率，48-72 小時檢測 mRNA 或蛋白表達。