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蛋白質印跡(WB)實驗的意義和步驟介紹

閱讀:1386          發布時間:2022-8-8

免疫印跡(WB)

免疫印跡是根據抗原抗體的特異性結合檢測復雜樣品中的某種蛋白的方法。免疫印跡(immunoblotting)又稱蛋白質印跡(Western blotting),是根據抗原抗體的特異性結合檢測復雜樣品中的某種蛋白的方法。該法是在凝膠電泳和固相免疫測定技術基礎上發展起來的一種新的免疫生化技術。由于免疫印跡具有 SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性,現已成為蛋白分析的一種常規技術。免疫印跡常用于鑒定某種蛋白,并能對蛋白進行定性和半定量分析。結合化學發光檢測,可以同時比較多個樣品同種蛋白的表達量差異。

實驗意義

WB用于鑒定能夠被特異性抗體識別的大分子抗原(通常是蛋白質),并測定抗原的分子量。

實驗步驟

1.蛋白樣品制備

2.電泳分離

3.電轉移

4.免疫印跡顯色:ECL顯色系統

結果展示

實驗完成周期及交付標準

1. 實驗周期:2-3周

2. 交付標準:黑白顯色圖、內參、灰度值分析、柱狀圖、實驗報告(實驗步驟、試劑、儀器等)

需確認的信息

1. 樣本種屬及類型,是組織還是細胞?

2. 需要檢測目標蛋白。

3. 檢測分樣本數及分組,每張膜的上樣順序?

4. 是否購買一抗,本公司可代購。


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