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技術文章

zeta life轉染NIH-3T3 (IF10.588)已更新

閱讀:825          發布時間:2022-9-5

 

 

一、 轉染小鼠胚胎成纖維細胞(NIH-3T3),轉染siRNA文章概述:

當NIH/3T3細胞生長密度達到60%,在不含FBS培養基的六孔板中進行轉染。對于細胞轉染使用5μM pGPU6/GFP/Neo-shTRIM11,siALKBH5,miR-21a-5p mimic,miR-590–5p mimic, miR-361–3p mimic, miR-202–3p mimic和相應對照,使用 Advanced DNA/RNA轉染試劑(#AD600025 Zeta life, USA) 對細胞轉染;在轉染24小時后分別對TRIM11或ALKBH5通過蛋白質印跡或qPCR檢測敲低效率。

二、其它

1、NIH/3T3細胞培養條件:文章選擇Z7181FBS-500胎牛血清培養(# Zeta life, USA)

2、文章作者:河北醫科大學公共衛生學院毒理學教研室、河北醫科大學環境與健康重點實驗室

3、標題:FcγRIIB The proteasome-dependent degradation of ALKBH5 regulates ECM deposition in PM2.5 exposure-induced pulmonary fibrosis of mice .(IF10.588)

三、轉染轉染NIH-3T3細胞原文

Cell transfection

Transfection was conducted when NIH/3T3 cells grown to 60% density in six-well plates with FBS absent medium. For cell transfection, 5 μM of pGPU6/GFP/Neo-shTRIM11, siALKBH5, miR-21a-5p mimic, miR-590–5p mimic, miR-361–3p mimic, miR-202–3p mimic and cor-responding control (Genepharma, Shanghai, China) was transfected into cells using Advanced DNA/RNA Transfection Reagent (Zeta life, USA) according to the supplier’s guidelines, respectively. TRIM11 or ALKBH5 knockdown efficiency was detected by western blotting or qPCR after 24 h post-transfection, respectively.

四、美國Zeta Life 公司與美國加利福尼亞大學舊金山校區聯合開發用于哺乳動物細胞、活體動物轉染的 Advanced DNA RNA 第三代多肽小分子轉染試劑,此技術成為新的蛋白功能、免疫細胞及干細胞治療、研發及生產的主要關鍵技術。

五、產品信息

 

 

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