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    上海創凌生物科技有限公司>技術文章>廣譜型DNA免核酸提取試劑盒產品操作介紹

    技術文章

    廣譜型DNA免核酸提取試劑盒產品操作介紹

    閱讀:705          發布時間:2023-11-16

    試劑盒應用

    本試劑盒中采用配方,能夠快速的裂解各種常見樣本,無需反復離心,通過裂解和吸附獲得高質量的基因組DNA。該DNA 無需進行純化可以直接用于PCR、熒光定量PCR、LAMP、STR等擴增。

    NuSmart® DNA Lysis 可用于血樣、唾液、腹水、細胞、組織、拭子、DNA 病毒、大腸桿菌、農桿菌、葡萄球菌、環境樣本(例如擦拭物、水樣本、鞋底)、支原體、衣原體以及植物等樣品中基因組DNA的提取。

    本試劑盒僅供研究使用,不可用于臨床、食品、化妝品等域。

    試劑盒組成

    保存條件

    4oC 保存。使用將NuSmart® DNA Lysis 充分混勻。

    需要準備

    金屬恒溫浴、離心機

    使用方法

    一、不同樣品的處理方法

    1. 組織液的處理

    (1)組織液包括組織研磨液、細胞懸液、血清、血液、唾液、尿液、精液、拭子處理液※等。取10 μL組織液置于離心管中。

    ※:棉簽放入500μL生理鹽水或無菌水中,浸泡5-10min,用力擠壓后取10 μL置于離心管中。

    (2)加入20 μL DNA Lysis。

    (3)充分混勻。

    (4)置于55oC 加熱5 分鐘。溶液即為DNA 模板。

    2. 組織塊的處理

    (1)用眼科剪剪取1-2mm 組織塊,并將組織塊剪成肉泥狀。

    (2)加入20 μL DNA Lysis。

    (3)充分混勻。

    (4)置于55oC 加熱5分鐘。

    (5)10,000rpm 離心2-3 分鐘,取上清。上清即為DNA 模板。

    3. 其他樣本的處理

    (1)菌類包括大腸桿菌、農桿菌、葡萄球菌等。取20 μL DNA Lysis 放置在離心管中。

    (2)用接種針/無菌牙簽挑取菌斑或10μL 培養溶液放入(1)中。

    (3)充分混勻。

    (4)置于55oC 加熱5 分鐘。溶液即為DNA 模板。

    4. DNA 病毒的處理

    (1)細胞培養液參考“組織液的處理"。

    (2)組織樣本參考“組織塊的處理"。

    5. 植物樣本的處理

    (1)葉片參考“組織塊的處理"。

    (2)種子需磨碎后參考“組織塊的處理"。

    二、推薦PCR 反應體系

    注意事項

    一、試劑盒使用注意事項

    (1)所有試劑按照溫度儲存。

    (2)實驗后務必對操作區進行消毒,消毒方式可以采用75%乙醇或核酸消除劑等。耗材需使用商品化的無酶耗材。

    (3)DNA Lysis 采用利配方,若出現肉眼可見小球狀物質屬于正常現象。

    二、試劑盒使用過程中注意事項

    (1)PCR 過程中推薦使用陰性對照和陽性對照。

    (2)整個過程中使用的吸頭、離心管等耗材應丟棄在含有75%乙醇或核酸消除劑的容器中,減少環境污染。

    三、試劑盒使用后注意事項

    (1)DNA Lysis 處理后的DNA 模板可在-20℃保存至少1 個月。避免反復凍融,防止基因組斷裂。

    (2)PCR 反應完成后,嚴禁在實驗區開蓋。在污染區進行瓊脂糖電泳,以防止氣溶膠污染。

    (3)為防止試劑盒污染,請勿將不同批號試劑盒混用。

    檢測實例

    來源 范圍

    細胞 293T、A549、Vero、PK15、Sp2/0、HCT-116、Marc145、ST、siHa、MCF-7

    人 頭發、唾液、咽拭子、全血

    小鼠 心、肝、脾、肺、腎、腦、脊柱、胃、大腸、小腸、膽囊、尾巴、腳趾、皮、耳朵、肌肉、EDAT 抗凝血、肝素鈉抗凝血、枸櫞酸鈉抗凝血

    豬 心、肝、脾、肺、腎、淋巴結、精液、全血、血清

    雞 胃、肝、心、肺、脾

    病毒 ASFV、PRV、PPV、PCV

    細菌 金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、農桿菌、結核桿菌

    真菌 酵母菌、白木耳、靈芝

    植物 煙草、擬南芥、油菜、水稻、大豆、玉米、小麥、棉花、百脈根、西紅柿、土豆、茄子、胡蘿卜、龍眼、荔枝、蘋果、香蕉、葡萄、鐵皮石斛、丹參、益母草、紅花、紫草、苦參、艾葉

    亞洲 鯽魚魚鰭、魚泡、魚鱗、魚籽

    其他物種 支原體、衣原體


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