7
當(dāng)前位置：北京中檢維康生物技術(shù)有限公司>>技術(shù)文章>>關(guān)于克倫特羅檢測試劑盒的檢測原理及注意事項
關(guān)于克倫特羅檢測試劑盒的檢測原理及注意事項
克倫特羅檢測試劑盒檢測原理
本試劑盒是利用競爭ELISA方法，在酶標板微孔上預(yù)包被抗克倫特羅抗原。檢測時，加入標準品或樣品溶液，克倫特羅抗體及酶標記物，包被抗原和加入樣本中的克倫特羅競爭性地與克倫特羅抗體結(jié)合后，再與酶標記物形成抗原抗體復(fù)合物，用TMB底物顯色；加入反應(yīng)終止液，在450nm波長酶標儀下進行檢測，樣品中的克倫特羅濃度與吸收光強度成反比。
樣本處理前須知
處理任何樣本時，都須注意：
實驗中必須使用一次性吸頭，在吸取不同的試劑時要更換吸頭。
實驗之前須檢查各種實驗器具是否干凈，必須使用潔凈實驗器具，以避免污染干擾實驗結(jié)果。
注意事項
室溫低于20℃或試劑及樣本沒有回到室溫（20-25℃）會導(dǎo)致所有標準的OD值偏低。
在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況，則會出現(xiàn)標準曲線不成線性，重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進行下一步操作。
反應(yīng)終止液為2M硫酸，避免接觸皮膚。如不慎滴漏到皮膚上，請盡快用水沖洗。
不要使用過了有效日期的試劑盒；也不要使用過了有效期的試劑盒中的任何試劑，摻雜使用過了有效期的試劑盒會引起靈敏度的降低；不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。
保存試劑盒于2-8℃，不要冷凍，將不用的微孔板放進自封袋重新密封。標準物質(zhì)和無色的發(fā)色劑對光敏感，因此要避免直接暴露在光線下。
顯色試劑有任何顏色表明發(fā)色劑變質(zhì)，應(yīng)當(dāng)棄之。0標準的吸光度（450nm）值小于0.5（A450nm<0.5 ）時，表示試劑可能變質(zhì)。
在加入底物液后，一般顯色15分鐘即可。若顏色較淺，可延長反應(yīng)時間到20分鐘（或更長），但不得超過30分鐘。反之，則減短反應(yīng)時間。
該試劑盒佳反應(yīng)溫度為25℃，溫度過高或過低將導(dǎo)致檢測吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。