立式蒸汽滅菌器的工作原理是利用飽和水蒸汽作用于負載上微生物一定時間，使微生物的蛋白質變性從而導致微生物死亡，以達到滅菌的目的。它通過濕熱殺滅微生物，蒸汽有較強的殺菌作用，能使菌體蛋白質含水量增加，使其容易因受熱而凝固，加速微生物的死亡過程。
其使用注意事項如下：
1、開蓋前必須確認壓力表指針為零，滅菌器內無壓力。
2、滅菌器水源水質必須符合高純水的要求，不得加入未經凈化處理過的自來水等水源。
3、對不同類型、不同滅菌要求的物品，不得放在一起滅菌。
4、滅菌周期結束需要進入下一門滅菌周期前，應補足水位。
5、每次滅菌結束，應將滅菌器側門板上帶鎖電源開關關閉，將電源斷路器斷開，滅菌器周圍應保持清潔。
6、滅菌器內積水應每天排除干凈，防止積水垢影響電熱管正常發熱及蒸汽質量，影響滅菌效果。
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