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高效液相色譜儀定量環(huán)不同有什么影響?

時(shí)間:2021/8/20閱讀:4714
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  定量環(huán)適用于不銹鋼或生物相容性PEEK制成的進(jìn)樣器。高效液相色譜儀定量環(huán)不同有什么影響?
  如果儀器是自動進(jìn)樣:很明顯,回路的大小決定了你的最大進(jìn)樣量。如果使用100ul定量環(huán),則最大進(jìn)樣量必須小于100ul。如果儀器是手動進(jìn)樣:理論上,精確進(jìn)樣量是循環(huán)的一半以上。也就是說,如果你的儀器的是10ul,進(jìn)樣量在5ul-10ul范圍內(nèi)更準(zhǔn)確。如果要進(jìn)樣1ul,結(jié)果的準(zhǔn)確性就會受到質(zhì)疑。常見的手動注射回路為20ul,注射量大部分為滿刻度。因?yàn)槿斯げ僮髡`差大。因此,在同一個實(shí)驗(yàn)中,在平行條件下,變化的主要是試液的濃度,而不是進(jìn)樣量的大小。另外,一定要注意樣品的清潔度,一定要過濾。否則,不溶性顆粒會堵塞回路并影響進(jìn)樣量。
  定量環(huán)使用注意事項(xiàng):
  進(jìn)樣量和定量環(huán)是否必須匹配?如果為20ul,則按藥典規(guī)定進(jìn)樣10ul。當(dāng)進(jìn)樣量與回路匹配時(shí),進(jìn)樣量應(yīng)該是回路的2倍左右,哪個更準(zhǔn)確?
  這種情況下,可以換成10微升的循環(huán)來解決問題。您不能使用10微升進(jìn)樣針將樣品注入20微升定量環(huán)。這是因?yàn)?1)10微升樣品在充滿流動相的20微升定量環(huán)中必須有樣品溶液的擴(kuò)散過程。濃度會不斷變化,導(dǎo)致每次進(jìn)樣的峰面積不同,無法準(zhǔn)確測定。(2)從進(jìn)樣回路的結(jié)構(gòu)上也可以看出,10微升的進(jìn)樣量不可能全部進(jìn)入定量回路。注射殘留物無法消除。因此,這種進(jìn)樣方式會在每次進(jìn)樣量之間造成較大的偶然誤差。鑒于以上兩個原因,進(jìn)樣量至少是定量環(huán)體積的2倍才能填充樣品整個定量環(huán)消除了濃度差引起的擴(kuò)散過程和進(jìn)樣殘留引起的進(jìn)樣量誤差,確保進(jìn)樣準(zhǔn)確。

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