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類器官培養基質膠鋪膠操作步驟

時間:2023/10/25閱讀:1291
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類器官培養基質膠鋪膠操作步驟

在類器官培養中,基質膠的移液(鋪膠)操作是非常重要的步驟,它能夠提供細胞生長的支架,并為類器官的發育和功能提供良好的環境。以下是詳細的操作步驟和注意事項,以確保移液(鋪膠)操作的成功。

 
操作步驟:
 
1. 準備工作:
   a. 確保工作區域和實驗器具都已消毒并無污染。
   b. 準備所需的基質膠和培養容器。
   c. 將基質膠放置在4℃的環境或冰上預冷,以避免凝固。
 
2. 移液(鋪膠)操作:
   a. 打開基質膠容器蓋子,使用合適大小的移液槍頭固定在移液器上。
   b. 緩慢將移液器頭插入基質膠中,確保吸頭浸入到基質膠中部。
   c. 緩緩移動移液器頭,吸取適量的基質膠,避免形成氣泡。
   d. 將移液器頭移至目標容器位置,緩慢而連續地排放基質膠,以保證均勻覆蓋整個表面。
   e. 避免移液器頭直接接觸容器邊緣或底部,以免引起凝固或氣泡的形成。
 
3. 溫度控制:
 在進行基質膠的移液(鋪膠)操作時,溫度控制是至關重要的一步。
   a. 在移液完成后,將培養容器轉移到預先溫控的37°C培養箱中。保持恒定的培養箱溫度對于促進基質膠的凝固至關重要。將培養容器放置在預熱好的培養箱中,確保溫度保持在37°C,以提供一個適宜的環境,促使基質膠快速凝固。
   
   b. 在基質膠開始凝固之前,確保已完成所有其他操作。一旦基質膠開始凝固,它會變得非常黏稠,進一步的操作將變得困難。因此,在將培養容器放入培養箱之前,應先確認已完成所有的移液(鋪膠)操作和其他需要進行的步驟。這包括在基質膠中添加細胞或其他生物材料,調節培養基的pH值,或者將培養容器安置在植物生長室或生物反應器中等。
 
4. 封閉容器:
   a. 在基質膠凝固之前,緊密封閉培養板或培養皿的蓋子,以防止基質膠的干燥。
 
注意事項:
 
1. 移液時要緩慢而連續,避免快速移液,以防止氣泡的形成。
2. 盡量避免移液器頭直接觸碰到容器的邊緣或底部,以免引起凝固或氣泡的產生。
3. 注意移液槍頭及其它實驗器具的清潔和無污染。
4. 確保培養板或培養皿的蓋子在移液過程中緊密封閉,以防止基質膠的干燥。
5. 在操作前預冷基質膠,并在移液完成后將容器置于37℃預先溫控的培養箱中,以促進基質膠的快速凝固。
 
以上是在類器官培養中,基質膠的移液(鋪膠)操作的詳細步驟和注意事項。遵循正確的操作步驟和注意事項,可以確保移液(鋪膠)操作的成功,為類器官的發育和功能提供良好的支持。


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