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毛細管電泳儀的故障排除

閱讀:1716      發布時間:2023-5-31
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毛細管電泳分離的檢測原理基于被測組分和背景電解質的吸光度不同,當被測組分通過檢測窗時,吸光度發生的變化服從朗伯-比爾定律,即在定的實驗條件下,吸光度與被測組分的濃度成正比。

故障排除:

一、無電泳峰:

1、檢查結果:沒有電流。

可能原因:毛細管堵塞或斷裂。

解決方案:用水沖洗毛細管,觀察是否有水流出。若無水流出,拆下卡盒檢查毛細管兩端和窗口是否斷裂。若毛細管沒斷裂,可用水反向高壓沖洗。緩沖液需過濾,將樣品過濾或離心去除其中的顆粒。

2、檢查結果:電流波動很大,甚至幾乎消失。

可能原因:緩沖液中有氣泡產生或區帶中樣品析出。

解決方案:將緩沖液超聲脫氣,如果還有此現象發生,則可能是區帶中樣品析出,可降低樣品濃度。對于在緩沖液中溶解度不高的樣品,需在緩沖液中加入添加劑。

3、檢查結果:電流初始值較小,后逐漸增大。

可能原因:樣品進樣量過大。

解決方案:減少進樣量。

二、電泳峰拖尾:

1、可能原因:毛細管窗口未開或窗口位置不正。

解決方案:打開毛細管檢測窗口或調整窗口位置。

2、可能原因:樣品在毛細管內壁吸附。

解決方案:對于蛋白質和核酸樣品,應盡量采用涂層毛細管、pH條件或動態涂層,防止樣品吸附。

 

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