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Curiosis血細(xì)胞計數(shù)板在操作上主要要以下五個步驟
閱讀：3064 發(fā)布時間：2020-9-10
利用Curiosis血細(xì)胞計數(shù)板在顯微鏡下直接計數(shù)，是一種常用的微生物計數(shù)方法。此法的優(yōu)點(diǎn)是直觀、快速。將經(jīng)過適當(dāng)稀釋的菌懸液放在Curiosis血細(xì)胞計數(shù)板載玻片與蓋玻片之間的計數(shù)室中，在顯微鏡下進(jìn)行計數(shù)。由于計數(shù)室的容積是一定的（0.1或0.4mm2），所以可以根據(jù)在顯微鏡下觀察到的微生物數(shù)目來換算成單位體積內(nèi)的微生物總數(shù)目。由于此法計得的是活菌體和死菌體的總和，故又稱為總菌計數(shù)法。適用于稀釋的菌懸液，即液體培養(yǎng)基中菌體的計數(shù)。
Curiosis血細(xì)胞計數(shù)板的操作步驟：
1、稀釋：將釀酒酵母菌懸液進(jìn)行適當(dāng)稀釋，菌液如不濃，可不必稀釋。
2、鏡檢計數(shù)室：在加樣前，先對計數(shù)板的計數(shù)室進(jìn)行鏡檢。若有污物，則需清洗后才能進(jìn)行計數(shù)。
3、加樣品：將清潔干燥的Curiosis血細(xì)胞計數(shù)板蓋上蓋玻片，再用無菌的細(xì)口滴管將稀釋的釀酒酵母菌液由蓋玻片邊緣滴一小滴，讓菌液沿縫隙靠毛細(xì)滲透作用自行進(jìn)入計數(shù)室，一般計數(shù)室均能充滿菌液。注意不可有氣泡產(chǎn)生。
4、顯微鏡計數(shù)：靜止5分鐘后，將Curiosis血細(xì)胞計數(shù)板置于顯微鏡載物臺上，先用低倍鏡找到計數(shù)室所在位置，然后換成高倍鏡進(jìn)行計數(shù)。在計數(shù)前若發(fā)現(xiàn)菌液太濃或太稀，需重新調(diào)節(jié)稀釋度后再計數(shù)。一般樣品稀釋度要求每小格內(nèi)約有5—10個菌體為宜。每個計數(shù)室選4或5個中格中的菌體進(jìn)行計數(shù)。
鏡檢計數(shù)方法：
a、方格內(nèi)細(xì)胞的計數(shù)順序?yàn)樽笊?rarr;右上→右下→左下；
b、壓在方格線上的細(xì)胞只計左線和上線上的細(xì)胞數(shù)；
c、酵母細(xì)胞若有粘連， 要數(shù)出團(tuán)塊中的每一個細(xì)胞；
d、出芽酵母的芽體體積若超過細(xì)胞體積的1/2，則算獨(dú)立個體；
e、計數(shù)總數(shù)不少于300個細(xì)胞。
5、清洗Curiosis血細(xì)胞計數(shù)板：使用完畢后，將Curiosis血細(xì)胞計數(shù)板在水籠頭上用水柱沖洗，切勿用硬物洗刷，洗完后自行晾干或用吹風(fēng)機(jī)吹干。鏡檢，觀察每小格內(nèi)是否有殘留菌體或其他沉淀物。若不干凈，則必須重復(fù)洗滌至干凈為止。