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熒光PCR實驗的關鍵步驟

閱讀:2234          發布時間:2020-7-15

熒光定量PCR實驗時所需的耗材有八連管,光學級八連管蓋子,光學級96孔板封膜,96孔板等。熒光定量PCR實驗過程分為RAN的提取,反轉錄, 熒光定量PCR反應,  數據分析。做熒光定量PCR實驗有幾個關鍵步驟需要注意1.應有合適數目的生物學重復及正確的對照樣品設置2.樣品的獲得應按照實驗流程中對采樣,處理和保存的要求及確保重復性并減小重復樣品間的標準偏差。3對RAN的純度和完整性進行質量控制。4.將總RAN反轉錄成cDNA的反轉錄反應。5.試驗中正確的引物設計,引物退火溫度確定,基因擴增效率摸索。6.實驗數據分析中內參基因選擇和統計方法計算。在做熒光定量PCR實驗過程中凍干工藝優化也起著重要作用。需要選擇適合的凍干機,如Pilot10-15EP解決用戶對凍干曲線不熟練的問題,縮短研發、小試周期, 提高凍干產品的一致性,解決用戶在應用當中的技術問題。

 

 

 

 

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