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六聯(lián)式薄膜過濾器操作規(guī)程
六聯(lián)式薄膜過濾器的使用首頁要將濾膜及過濾器支架或?qū)⑦^濾器座、漏斗和漏斗蓋在使用前采用121℃高壓滅菌30分鐘。
1、打開預(yù)先滅菌的過濾器支架或?qū)⑦^濾器座、漏斗和漏斗蓋在沸水中浸沒一分鐘作消毒。若沒有沸水，用95%酒精噴灑于漏斗和漏斗蓋，然后將其點(diǎn)燃，在火熄滅以后，讓過濾器冷卻至40℃以下，如果必須使用酒精，漏斗必須用耐火材料制造。
2、用水煮過或火焰滅菌鉗子，將無菌過濾器的底座部分安裝于過濾燒瓶或真空管道上。
3、用火燒過的鑷子放一張無菌薄膜在過濾器底座上，根據(jù)測(cè)試目的，使用特定的過濾膜：總菌數(shù)/大腸桿菌數(shù)：0.45um薄膜，酵母菌和霉菌：0.80um薄膜。
4、用水煮過或火焰滅菌鉗子，將過濾器漏斗和漏斗蓋放置于底座上。如漏斗蓋帶有管口，則在管口處裝上過濾器，或予以封住。待過濾器的溫度低于40℃后才可加樣品。
5、重復(fù)以上步驟，直到所有樣品都完成過濾。
6、將樣品直接倒入消毒和冷卻的過濾器漏斗中。蓋上過濾器漏斗的蓋子。若使用勺，須將勺放在95%的酒精的燒杯中。
7、打開真空泵，使樣品通過薄膜。打開裝有PH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液的玻璃瓶，先用火燒螺紋處，然后倒入約20毫升PH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液于過濾漏斗內(nèi)，進(jìn)行沖洗。施加真空，使PH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液通過薄膜。在過濾完樣品或PH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液后，不要讓真空施加時(shí)間連續(xù)超過30秒以上。
8、用火焰滅菌鉗子從過濾器底座上取下薄膜。輕微提起裝有吸收墊和培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿的蓋子，并放下薄膜，直到鑷子相對(duì)側(cè)的薄膜邊靠到吸收墊邊為止。將薄膜貼在吸收墊上滾動(dòng)，以排除氣泡。蓋上蓋子，在工作臺(tái)上輕輕拍打培養(yǎng)皿，以驅(qū)除薄膜下面的氣泡。