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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
肝動脈 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X8349 |
細胞簡介：
兔肝動脈平滑肌分離自肝動脈組織；在胚胎期，肝臟有3條動脈供血，分別來源于胃左動脈、腹腔動脈和腸系膜上動脈，這3條動脈分別的不同部位。出生后，一般保留一條動脈，大部分為起源于腹腔動脈的動脈，由其分出左、右肝動脈供應左、右半肝。偶爾也可見起源于胃左動脈的動脈或起源于腸系膜上動脈的動脈。但也有2條動脈并存的情況，如起源于腹腔動脈和起源于胃左動脈（25%），起源于腹腔動脈和起源于腸系臘上動脈（10%），而起源于胃左動脈和起源于腸系膜上動脈的2條動脈同時存在的情況比較少見。此外，還有5%像胚胎期一樣，3條動脈同時存在。這種起源于腹腔動脈以外的肝動脈稱為迷走肝動脈，如果肝臟沒有起源于腹腔動脈的動脈供血時，此種異位起源的肝動脈稱替代動脈，如果在常見肝動脈類型外，還有一支這種異位起始的動脈的一部分血流，這種肝動脈稱副肝動脈。肝動脈平滑肌細胞是肝動脈的重要結構細胞之一，在機體的正常生理過程中發揮著重要作用。肝動脈平滑肌細胞原代分離培養3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態學特征和生長特點。血管平滑肌細胞的加速生長潛能是血管疾病進展的關鍵因素，新研究表明血管平滑肌細胞表達的ICAM-1和VCAM-1能促進血管壁的炎癥反應，并且與血管疾病的發展及穩定性有關。
原代細胞的培養條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發生脫落，漂浮；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時，應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；
4、長期培養時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介：
實驗室分離的兔肝動脈平滑肌采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
實驗室分離的兔肝動脈平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息：
培養基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳5代左右；3代以內狀態佳
消化液：0.25%
培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔肝動脈平滑肌體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種：
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品：
豬Ⅲ型膠原(ColⅢ)試劑盒 組裝/原裝
豬Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)試劑盒 組裝/原裝
植物玉米素核苷(ZR)試劑盒 組裝/原裝
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EFNA4重組人 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白 Protein
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HA Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin /僀?僀
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CLIAKitforAlpha1Beta-GP(HumanAlpha1Betaglycoprotein)ELISAKit人α1β糖蛋白
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兔肝動脈平滑肌細胞小鼠IgG Fc片段(IgGFcγ)試劑盒
Rat advanced glycation end products (AGEs) ELISA Kit 大鼠晚期糖基化終末產物(AGEs)試劑盒
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