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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
股骨、脛骨組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 不規則細胞 | YS-01X7495 |
細胞簡介：
大鼠骨內膜間充質干分離自股骨、脛骨；骨內膜是一層致密結締組織膜，覆蓋在骨的表面（關節面除外），新鮮骨內膜呈粉紅色，含有豐富的血管、神經和成骨細胞。此外，附著于骨的肌腱、韌帶于附著部位都與骨內膜編織在一起。因而骨內膜與骨質結合甚為牢固。骨內膜富含血管、神經，通過骨質的滋養孔分布于骨質和骨髓。骨內膜分內、外兩層，外層主要是粗大的膠原纖維束，部分纖維穿入骨質，使骨內膜固定于骨面；內層疏松，含成骨細胞和破骨細胞（分別具有產生新骨質和改建骨的功能）。骨髓腔和骨松質的網眼也襯著一層菲薄的結締組織膜，叫做骨膜。骨內膜的內層和骨膜有分化成骨細胞和破骨細胞的能力，以形成新骨質和破壞、改造已生成的骨質，所以對骨的發生、生長、修復等具有重要意義。骨內膜間充質干細胞是一種具有高度自我更新能力和多向分化潛能的干細胞，可以向骨、軟骨、肌組織、皮膚、脂肪、神經等多種組織分化，因此可以作為組織工程中的種子細胞。骨內膜間充質干細胞的體外培養條件要求較高，在培養過程中，受貼壁時間、種植密度、血清含量、培養溫度和培養基pH值等條件的影響。
方法簡介：
見說明
質量檢測：
本公司生產的大鼠骨內膜間充質干采用沖洗骨髓、消化骨內膜、差速貼壁法結合培養基篩選制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶；經CD90/CD44、CD34/CD45免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息：
DMEM-F12、FBS、間充質干細胞生長添加劑、Glutamine、Penicillin、Streptomycin等
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種：
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品：
小鼠糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)檢測試劑盒 96T/48T
小鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)檢測試劑盒 96T/48T
小鼠糖原合成酶激酶(GSK)檢測試劑盒 96T/48T
小鼠糖皮質類固醇受體(GR)檢測試劑盒 96T/48T
小鼠糖原0酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human melatonin sulfate (MS) ELISA Kit 人褪黑色素(MS)檢測試劑盒
HumanLipoarabinomannan,LAMELISAKit 人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
Chickeni-iodothyronine,T3檢測試劑盒雞三甲狀腺原(T3)檢測試劑盒規格：96T/48T
載玻片細胞TNFALPHA蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次
MouseEsiol,E3ELISAKit小鼠雌三醇(E3)檢測試劑盒規格：96T/48T
血紅蛋白ε抗體
PE-Cy5標記小鼠CD90單克隆抗體
HA重組甲型流感 H1N1 (A/Ohio/07/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
PEPT1 (Peptide-transporters 1 0.5mgPEPT1 (Peptide-transporters 1) 腸道肽轉運蛋白(小肽轉運蛋白)多肽
DCN重組人 Decorin / DCN / SLRR1B 蛋白 Protein
CGB5 Protein Human 重組人 CGB5 蛋白
CD34 Protein Human 重組人 CD34 蛋白
PEPT1 (Peptide-transporters 1 0.5mgPEPT1 (Peptide-transporters 1) 腸道肽轉運蛋白(小肽轉運蛋白)多肽
CGB5 Protein Human 重組人 CGB5 蛋白
HA重組甲型流感 H1N1 (A/Ohio/07/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
CD34 Protein Human 重組人 CD34 蛋白
DCN重組人 Decorin / DCN / SLRR1B 蛋白 Protein
大鼠骨內膜間充質干細胞豬肌球蛋白輕鏈0酸酶(MLCP)ELISA 試劑盒
Neuroophic factor glial cell line derived (GDNF) ELISA Kit 人膠質細胞系來源的神經營養因子(GDNF)檢測試劑盒
Porcineacetylcholine,ACHELISAKit 豬乙酰(ACh)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforAlphaNAG(MouseAlphaN-acetylglucosaminidase)ELISAKit小鼠αN已酰氨基葡糖苷酶
血液離子(K)濃度化學比色法定量檢測試劑盒20次
PlaIndole-3-aceticacid,IAAELISAKit植物吲哚乙酸(IAA)檢測試劑盒規格：96T/48T
原代細胞的培養條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發生脫落，漂浮；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時，應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；
4、長期培養時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
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