詳細介紹
需要自備的器材:
1.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調移液器(2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。
參數規格:
產品名稱:腸道腺病毒41型PCR檢測試劑盒
英文名稱:Enteric Adenovirus41PCR
貨號:YS30699-R
產品規格:50T
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
相對定量分析方法 :
2-ΔΔCt
前提:目標序列和內參序列的擴增效率接近100%且偏差在5%以內
1、用內參基因的CT值歸一目標基因的CT值:
ΔCT(test)= CT(target,test)-CT(ref,test)
ΔCT(calibrator)= CT(target,calibrator)-CT(ref, calibrator)
2、用校準樣本的ΔCT值歸一試驗樣本的ΔCT值:
ΔΔCT= ΔCT(test) - ΔCT(calibrator)
3、計算表達水平比率:
2 –ΔΔCT=表達量的比值
使用方法:
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
具有下列特點:
1.根據 指標的保守序列設計的專一性引物,與相關病毒無交叉反應。
2.靈敏度比常規 PCR 高 2-3 個數量級,可以達到幾百拷貝/反應。
3.即開即用,用戶只需要提供樣品模板,操作簡單,定量準確快速。
4.一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續污染。
5.本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR。
6.本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
注意事項:
1. 建議使用新鮮采取的動物組織,若為長期冷凍組織,應盡量避免反復凍融,否則會導致模板的降解,影響PCR效率。
2. 試劑Buffer AL若低溫保存,易產生沉淀。在使用前務必將其在室溫中放置一段時間,也可在37℃水浴中預熱10 min,以溶解沉淀,混勻后再使用。
3. 電泳檢測時,切勿使用含有SDS的Loading Buffer。否則,電泳時會在泳道中出現一大團拖尾亮帶,影響實驗結果。
4. 建議擴增片段長度1 kb以內,以便擴增效率佳。
?5. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
Ago1 antibody原裝、分裝肽合成/有機合成用縮合HATU和HBTU
Argonaute-2 antibody原裝、分裝Taq Mut S(檢測基突變的酶)
STAT3 antibody原裝、分裝明膠
FOXA2 antibody原裝、分裝2-甘油二鈉,*,Wako
Iba1 antibody原裝、分裝二月桂二基
FOXC1 antibody - ChIP Grade原裝、分裝聚二醇辛基苯基醚/曲拉通X-100
FOXE1 antibody原裝、分裝膠體滴定 二醇殼聚糖、基二醇殼聚糖
ARH antibody原裝、分裝2-
REV1 antibody原裝、分裝聚二醇 6000HOXB1 antibody原裝、分裝5-(二氧基酰)-5-基-1-吡咯啉 N-氧化物(>98.0%(N))
Recombinant Human Prolactin/PRL protein原裝、分裝亞基苯(>98.0%(GC))
Recombinant Human Prolactin/PRL protein原裝、分裝亞基苯(>98.0%(GC))
PTRF antibody原裝、分裝2,4,6-三叔基亞基苯(>98.0%(GC))
Recombinant Human Alpha-synuclein protein (1-112aa)原裝、分裝2,4,6-三叔基亞基苯(>98.0%(GC))
Recombinant Human Alpha-synuclein protein (1-112aa)原裝、分裝3,3,5,5-四基-1-吡咯啉 N-氧化物(>98.0%(GC))
Recombinant Human beta Synuclein protein原裝、分裝4-氨基-2,2,6,6-四基哌啶1-氧自由基(>97.0%(GC))
Recombinant Human beta Synuclein protein原裝、分裝4-氨基-2,2,6,6-四基哌啶1-氧自由基(>97.0%(GC))
Arx antibody原裝、分裝4-酰氨基-2,2,6,6-四基哌啶1-氧基自由基(>98.0%(GC))
腸道腺病毒41型PCR檢測試劑盒SLC8A3 antibody原裝、分裝DirectAmp Animal Tissue PCR Kit 組織細胞PCR直接擴增試盒
NUCKS1 antibody原裝、分裝DirectAmp Mouse Tail PCR Kit 鼠尾PCR直接擴增試盒
PTGR2 antibody原裝、分裝DirectAmp Mouse Tail PCR Kit 鼠尾PCR直接擴增試盒
CKAP4 antibody原裝、分裝DirectAmp 植物PCR直接擴增試盒
LDHA antibody原裝、分裝DirectAmp 植物PCR直接擴增試盒
Recombinant Human Cdk6 protein原裝、分裝KOD DNA Polymerase
INTS11 antibody原裝、分裝KOD DNA Polymerase
Recombinant Human P70 S6 Kinase beta/SRK protein原裝、分裝Taq DNA Polymerase(Buffer包含鎂離子)
Recombinant Human MEK2 protein原裝、分裝Taq DNA Polymerase(Buffer包含鎂離子)