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產品簡介
睡眠嗜組織菌PCR檢測試劑盒說明書引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。
詳細介紹
產品名稱：睡眠嗜組織菌PCR檢測試劑盒說明書
英文名稱：Histophilus somniPCR
貨號：YS30887-R
產品規格：50T
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。框原理是由一對引物介導，能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增，經過n個熱循環擴增，擴增產物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0＜E＜1,擴增效率＝倍，使得檢測擴增產物中的特定基因成為可能。
適用范圍【參考值】
1.試劑盒有效性判定：
（1）陽性對照：有典型S型擴增曲線或Ct值≤35。
（2）陰性對照：Ct值＞38或無Ct值，線形為直線或輕微斜線，無指數增長期。
2.標本結果判定：
（1）陽性：標本檢測結果Ct值≤35或有明顯指數增長期。
（2）可疑：標本檢測結果Ct值在35～38范圍內。此時應對標本進行重復檢測，如重復實驗結果Ct值仍在35～38范圍內，有明顯指數增長期，則判定為陽性，否則為陰性。
（3）陰性：標本檢測結果Ct值＞38或無Ct值。
PCR實驗步驟:
典型的PCR由（1）高溫變性模板；（2）引物與模板退火；（3）引物沿模板延伸三步反應組成一個循環，通過多次循環反應，使目的DNA得以迅速擴增。
其主要步驟是：
將待擴增的模板DNA置高溫下（通常為93℃-94℃）使其變性解成單鏈；
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復性溫度下分別與目的基因兩側的兩條單鏈互補結合，兩個引物在模板上結合的位置決定了擴增片段的長短；
耐熱的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入，以目的基因為模板從5’→3’方向延伸，合成DNA的新互補鏈。
下列是公司正在*的產品：
CXCL2 antibody原裝、分裝辛伐他汀
MCP1 antibody原裝、分裝辛伐他汀
Recombinant rat MCP1 protein原裝、分裝辛伐他汀
Macrophage Inflammatory Protein 1 alpha / CCL3 antibody原裝、分裝辛伐他汀,辛伐他（標準品）
RANTES antibody原裝、分裝康普瑞汀二鈉鹽
Recombinant rat RANTES protein原裝、分裝康普瑞汀二鈉鹽
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CNTF antibody原裝、分裝西梭米星/西索
Recombinant human CNTF protein原裝、分裝西梭米星/西索CD68 antibody [FA-11]原裝、分裝血管緊張素III
Polyethylene glycol antibody [PEG-B-47b] (Biotin)原裝、分裝蜂毒明肽; 蜂針液明肽
TNF alpha antibody [EP1085Y]原裝、分裝枸櫞氯米芬,克羅米芬
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TNF alpha antibody [EP1085Y]原裝、分裝枸櫞氯米芬,克羅米芬
Neutrophil antibody [7/4] (FITC)原裝、分裝ML-176;SR-3335
Human Relaxin 1 + 2 peptide原裝、分裝ML-176;SR-3335
Neutrophil antibody [7/4]原裝、分裝ML-176;SR-3335
Chromogranin A antibody [LK2H10], prediluted原裝、分裝Semaxanib(SU-5416 )
睡眠嗜組織菌PCR檢測試劑盒說明書Recombinant human FGFR2 protein原裝、分裝黃士(>98.0%(N))
Recombinant human FGFR2 protein原裝、分裝陰丹
Recombinant human FGFR2 protein原裝、分裝久洛尼定(>97.0%(GC)(T))
Recombinant human JAK3 protein原裝、分裝久洛尼定(>97.0%(GC)(T))
Recombinant human JAK3 protein原裝、分裝9-基久洛尼定(>98.0%(GC))
Recombinant human PAK6 protein原裝、分裝9,10-菲醌(>99.0%(GC))
Recombinant human PAK6 protein原裝、分裝9,10-菲醌(>99.0%(GC))
Recombinant human NEK3 protein原裝、分裝菲啶(>98.0%(GC))
Recombinant human NEK3 protein原裝、分裝5'-間三聯苯硼(含有數量不等的酐)
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μ
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測
三、注意事項
１．PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行。好設立一個的PCR實驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風險有影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡單越好。
３．所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。