詳細介紹
操作步驟:
1)使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
2)根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內。
3)加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4)甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
5)每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
7)每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8)取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
9)在450nm波長處測定各孔的OD值。
產品名稱 | TNFαElisaKit |
英文名稱 | rabbit Tumor necrosis factor α, TNFα Elisa Kit |
規格 | 48T/96T |
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關,我司嚴格按照進行,已獲得國家承認的“三證”,每一個產品都有對應的批號,只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產品,不必擔心會有過期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20-30 min后,再進行測定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應微孔內的溫度較快地達到所需的溫度,以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內源性干擾因素:包括類風濕因子、補體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;
類風濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標本用聯有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測抗原時,可用加入到標本稀釋液中使RF降解;
補體的控制方法:
①用EDTA稀釋標本;
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活;
2.外源性干擾因素:包括標本溶血、細菌污染、保存時間過長或凝固不全等;
控制方法:采血時規范操作,采集的血液勿用力震蕩,以防溶血;收集標本時采用無菌試管,經檢測后再低溫凍存;保存時間不宜過久,檢測時盡量采用新鮮標本;對于凝固不全的血標本可適當加入抗凝劑,并放入37℃水中1 h,待充分凝固后再離心分離血清。
具有如下優點:
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩定的重復性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等等多種標本類型;
五、性價比非常好,節省實驗經費。
Sulfadiazine2-對基酰嘧25PK細胞培養級,95%
Sudanred7B溶紅1925克BR,
SudanI蘇旦I1公斤BR,99%
SudanblackB蘇旦B5克BR,
SudanⅣ蘇旦IV5克BR
SudanⅢ三號蘇丹25克BR,
SudanⅡ溶橙7100克BR,
SucrosePhosphorylase蔗糖化酶5克超,99%
Sucroseβ-D-糖基-α-D-吡葡萄苷250毫克高,
Sucralose三代蔗糖10克高,
Succinimide琥珀酰亞25毫克高,
Succinicacid琥珀5克BR,粉末
Subericacid十八二50毫克BR
Strontiumoxalate二鍶250毫升CP,69%
Strontiumfluoride二化鍶500克AR,99.5%
TNFαElisaKitn去基阿奇霉素標準品 英文名稱:NDemethylazithromycin
那格列相關物質A標準品 英文名稱:Nateglinide Related Compound A 1890988
那格列標準品 英文名稱:Nateglinide 105816044
納他霉素標準品 英文名稱:Natamycin 7681938
那拉曲坦混合物標準品 英文名稱:Naratriptan Resolution Mixture
鹽那拉曲坦標準品 英文名稱:Naratriptan Hydrochloride 143388641
基鹽霉素標準品 英文名稱:Narasin 55134139
普生標準品 英文名稱:Naproxen Sodium 26159342
普生標準品 英文名稱:Naproxen 22204531
標準品 英文名稱:Naphthalene 91203
鹽啉標準品 英文名稱:Naphazoline Hydrochloride 550992
諾龍標準品 英文名稱:Nandrolone Phenpropionate CIII 62908
癸諾龍標準品 英文名稱:Nandrolone Decanoate CIII 360703
諾龍標準品 英文名稱:Nandrolone CIII 434220
曲標準品 英文名稱:Naltrexone 16590413
基(1十六基)二基銨 進口、國產 英文名稱:CDAB 含量:IND
基代 進口、國產 英文名稱:Ethylbenzene 含量:AR,99%
基異基基 進口、國產 英文名稱:3,5Dimethyl3hexanol 含量:SP,99.8%
進口、國產 英文名稱:Ethanethioamide 含量:AR
脫酶 進口、國產 英文名稱:AldehydeDehydrogenase,potassiumactivated 含量:BR,5′d(NNNNNNNNN)3′
1酯 進口、國產 英文名稱:αNapthylacetate 含量:超,98%
2酯 進口、國產 英文名稱:βNapthylacetate 含量:高,98%,無水物
基基酯 進口、國產 英文名稱:Benzylacetate 含量:1750±50類型
鎘二水合物 進口、國產 英文名稱:Cadmiumacetatedihydrate 含量:CP,98%
辛酯 進口、國產 英文名稱:Octylacetate 含量:AR,98%
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.溫浴
1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發,板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。