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MG1655(DE3)化轉表達感受態

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更新時間:2023-04-26 19:07:03瀏覽次數:1968

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產品簡介

供貨周期 現貨 應用領域 生物產業
MG1655(DE3)化轉表達感受態 菌株來源于 JM109,用于高效表達克隆于含有噬菌體 T7 啟動子的表達載體(如 pET 系 列)的基因。λ 噬菌體 DE3 區含有 T7 噬菌體 RNA 聚合酶,該區整合于 JM109 的染色體上,所以稱為 JM109(DE3)。可同時表達 T7 RNA 聚合酶和大腸桿菌 RNA 聚合酶,用于 pET 系列,pGEX,
pMAL

詳細介紹

MG1655(DE3)化轉表達感受態

產品簡介 JM109(DE3)菌株來源于 JM109,用于高效表達克隆于含有噬菌體 T7 啟動子的表達載體(pET )的基因。λ 噬菌體 DE3 區含有 T7 噬菌體 RNA 聚合酶,該區整合于 JM109 的染色體上,所以稱 JM109(DE3)。可同時表達 T7 RNA 聚合酶和大腸桿菌 RNA 聚合酶,用于 pET 系列,pGEXpMAL 等質粒的蛋白表達。JM109(DE3)菌株不可用于藍白斑篩選試驗。經 pUC18 質粒轉化檢測, JM109(DE3)感受態細胞的轉化效率可達 108 cfu/μg DNA存儲條件 -80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。 質量控制 pRARE 外,無外源質粒 DNA 殘留; 化學法轉化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA使用方法 1. 將感受態細胞從-80 ℃中取出,置于冰浴中融化; 2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態細胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激 90s 后,立刻置于冰浴中靜置 2-3 min4. 向離心管中加入 900 μL LB SOC 培養基(室溫或 37 ℃預熱),后置于 37 ℃搖床復壯 45 min5. 取不同體積的轉化產物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養箱培養過夜。

MG1655(DE3)化轉表達感受態

注意事項 1. 感受態細胞冰浴中解凍后應立即使用; 2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態細胞體積的 1/103. 加入待轉化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態細胞,僅用手指輕彈即可; 4. 為確保.高轉化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。產品簡介 JM109(DE3)菌株來源于 JM109,用于高效表達克隆于含有噬菌體 T7 啟動子的表達載體(pET )的基因。λ 噬菌體 DE3 區含有 T7 噬菌體 RNA 聚合酶,該區整合于 JM109 的染色體上,所以稱 JM109(DE3)。可同時表達 T7 RNA 聚合酶和大腸桿菌 RNA 聚合酶,用于 pET 系列,pGEXpMAL 等質粒的蛋白表達。JM109(DE3)菌株不可用于藍白斑篩選試驗。經 pUC18 質粒轉化檢測, JM109(DE3)感受態細胞的轉化效率可達 108 cfu/μg DNA。  存儲條件 -80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。 質量控制 pRARE 外,無外源質粒 DNA 殘留; 化學法轉化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA使用方法 1. 將感受態細胞從-80 ℃中取出,置于冰浴中融化; 2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態細胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激 90s 后,立刻置于冰浴中靜置 2-3 min4. 向離心管中加入 900 μL LB SOC 培養基(室溫或 37 ℃預熱),后置于 37 ℃搖床復壯 45 min5. 取不同體積的轉化產物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養箱培養過夜。 注意事項 1. 感受態細胞冰浴中解凍后應立即使用;

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2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態細胞體積的 1/103. 加入待轉化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態細胞,僅用手指輕彈即可; 4. 為確保.高轉化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。產品簡介 JM109(DE3)菌株來源于 JM109,用于高效表達克隆于含有噬菌體 T7 啟動子的表達載體(pET )的基因。λ 噬菌體 DE3 區含有 T7 噬菌體 RNA 聚合酶,該區整合于 JM109 的染色體上,所以稱 JM109(DE3)。可同時表達 T7 RNA 聚合酶和大腸桿菌 RNA 聚合酶,用于 pET 系列,pGEXpMAL 等質粒的蛋白表達。JM109(DE3)菌株不可用于藍白斑篩選試驗。經 pUC18 質粒轉化檢測, JM109(DE3)感受態細胞的轉化效率可達 108 cfu/μg DNA。  存儲條件 -80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。 質量控制 pRARE 外,無外源質粒 DNA 殘留; 化學法轉化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA使用方法 1. 將感受態細胞從-80 ℃中取出,置于冰浴中融化; 2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態細胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激 90s 后,立刻置于冰浴中靜置 2-3 min; 4. 向離心管中加入 900 μL LB SOC 培養基(室溫或 37 ℃預熱),后置于 37 ℃搖床復壯 45 min5. 取不同體積的轉化產物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養箱培養過夜。 注意事項 1. 感受態細胞冰浴中解凍后應立即使用; 2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態細胞體積的 1/103. 加入待轉化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態細胞,僅用手指輕彈即可; 4. 為確保.高轉化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。

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