做抑菌試驗牛津杯如何使用?
閱讀:7935 發布時間:2021-10-15
牛津杯在做抗生素作用效果實驗時要用,用于微生物培養實驗,測定不同藥物對細菌的敏感度。實驗時在培養基上接種微生物,生長出來后,放上牛津杯,把抗生素倒到牛津杯里,然后繼續培養,過一段時間,觀察抑菌圈的大小,判斷抗生素的效果。牛津杯法,是抗生素效價測定的一種方法,通常可以分為二劑量法和三劑量法。
牛津杯在做抑菌試驗時的操作步驟如下:
將已滅菌的瓊脂培養基加熱到*融化,倒在培養皿內,每皿15ml(下層),待其凝固。此外,將融化的PDA培養基冷卻到50℃左右混入試驗菌17號,將混有菌的培養基5ml加到已凝固的培養基上待凝固(上層)。
以無菌操作在培養基表面直接垂直放上牛津杯(內徑6mm、外徑8mm、高10 mm的圓形小管,管的兩端要光滑,也可用玻璃管、瓷管),輕輕加壓,使其與培養基接觸無空隙,在杯中加入待檢樣品(發酵液),杯子一般可以裝240微 升,勿使其外溢。加滿后置37℃培養16-18小時,觀察結果,抑菌圈用尺直接量就可以。在培養中,一方面試驗菌開始生長,另一方面抗生素呈球面擴散,離杯越近,抗生素濃度越大,離杯越遠抗生素濃度越小。隨著抗生素濃度減小,有一條抑菌濃度帶,在帶范圍內,菌不能生長,而呈透明的圓圈,這就叫“抑菌圈”。抗生素濃度越高,抑菌圈越大。