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| 供貨周期 | 現貨 | 規格 | T25培養瓶x1 1.5ml凍存管x2 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | BFN60700188 | 應用領域 | 醫療衛生,生物產業 |
| 主要用途 | 僅供科研 |
細胞名稱 | 人羊膜細胞WISH |
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貨物編碼 | BFN60700188 | ||
產品規格 | T25培養瓶x1 | 1.5ml凍存管x2 | |
細胞數量 | 1x10^6 | 1x10^6 | |
保存溫度 | 37℃ | -198℃ | |
運輸方式 | 常溫保溫運輸 | 干冰運輸 | |
安全等級 | 1 | ||
用途限制 | 僅供科研用途 1類 | ||
培養體系 | DMEM高糖培養基（Hyclone）+10%胎牛血清（Gibco）+1%雙抗（Hyclone） | ||
培養溫度 | 37℃ | 二氧化碳濃度 | 5% |
簡介 | 這株細胞的起源是正常羊膜，但隨后通過同工酶分析、HeLA標記染色體和DNA指紋法分析，它的起源是HeLa細胞污染的。角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。注意：這株細胞包含HeLa標記染色體，是從HeLa污染細胞中建株的。經過流式驗證，細胞純度98% 。該細胞引種自ATCC CCL-25 | ||
注釋 | Problematic cell line: Contaminated. Shown to be a HeLa derivative (PubMed=5641128; PubMed=566722; PubMed=1246601; PubMed=6451928; PubMed=20143388). Originally thought to originate from cells of the amniotic sac of Susan Hayflick, the daughter of Leonard Hayflick. Part of: Naval Biosciences Laboratory (NBL) collection (transferred to ATCC in 1982). Registration: International Cell Line Authentication Committee, Register of Misidentified Cell Lines; ICLAC-00013. Transformant: NCBI_TaxID; 333761; Human papillomavirus type 18 (HPV18). Omics: Genome sequenced (low read coverage). | ||
STR信息 | Amelogenin X CSF1PO 9,10 D2S1338 17 D3S1358 15,18 D5S818 11,12 D7S820 8,12 (ATCC; CCRID; JCRB; KCLB) 12 (ECACC) D8S1179 12,13 D13S317 13.3 (ATCC; CCRID; JCRB; KCLB) 14 (ECACC) D16S539 9,10 D18S51 16 D19S433 13,14 D21S11 27,28 FGA 21 TH01 7 TPOX 8,12 vWA 16,18 | ||
參考文獻 | PubMed=6451928; DOI=10.1126/science.6451928 Nelson-Rees W.A., Daniels D.W., Flandermeyer R.R. Cross-contamination of cells in culture. Science 212:446-452(1981)
CLPUB00262 Gold M. A conspiracy of cells. One woman's immortal legacy and the medical scandal it caused. (In) ISBN 9780887060991; pp.1-171; State University of New York Press; Albany (1986)
PubMed=20143388; DOI=10.1002/ijc.25242 Capes-Davis A., Theodosopoulos G., Atkin I., Drexler H.G., Kohara A., MacLeod R.A.F., Masters J.R.W., Nakamura Y., Reid Y.A., Reddel R.R., Freshney R.I. Check your cultures! A list of cross-contaminated or misidentified cell lines. Int. J. Cancer 127:1-8(2010)
PubMed=23925245; DOI=10.1038/nature12064 Adey A., Burton J.N., Kitzman J.O., Hiatt J.B., Lewis A.P., Martin B.K., Qiu R., Lee C., Shendure J. The haplotype-resolved genome and epigenome of the aneuploid HeLa cancer cell line. Nature 500:207-211(2013) | ||
1、收到人羊膜細胞WISH7細胞，請查看瓶子是否有破裂，培養基是否漏出，是否渾濁，如有請盡快聯系。
2、收到人羊膜細胞WISH7細胞，如包裝完好，請在顯微鏡下觀察細胞。,由于運輸過程中的問題，細胞培養瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來，顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況，出現此狀態時，請不要打開細胞培養瓶，應立即將培養瓶置于細胞培養箱里靜止 3-5 小時左右，讓細胞先穩定下，再于顯微鏡下觀察，此時多數細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁，請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理。
3、收到人羊膜細胞WISH7細胞后，請鏡下觀察細胞，用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多，請離心收集細胞，接種到一個新的培養瓶中。棄掉原液，使用新鮮配制的培養基，使用進口胎牛血清。剛接到細胞，若細胞不多時 血清濃度可以加到 15％去培養。若細胞迏到 80%左右 ，血清濃度還是在 10％。
4、收到人羊膜細胞WISH細胞時如無異常情況 ，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養瓶中培養基吸出，留下 5-10ML 培養基繼續培養：超過 80%匯合度時，請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞，吸出培養液，1000 轉/分鐘離心 3 分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。
5、將培養瓶置于 37℃培養箱中培養，蓋子微微擰松。吸出的培養基可以保存在滅菌過的瓶子里，存放于 4℃冰箱，以備不時之需。
6、24 小時后，人羊膜細胞WISH細胞形態已恢復并貼滿瓶壁，即可傳代。（貼壁細胞）將培養瓶里的培養基倒去，加 3-5ml（以能覆蓋細胞生長面為準）PBS 或 Hanks’液洗滌后棄去。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化，消化時間以具體細胞為準，一般 1-3 分鐘，不超過 5 分鐘?？梢苑湃?7℃培養箱消化。輕輕晃動瓶壁，見細胞脫落下來，加入 3-5ml 培養基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞，使之*脫落，然后將溶液吸入離心管內離心，1000rpm/5min。棄上清，視細胞數量決定分瓶數，一般一傳二，如細胞量多可一傳三，有些細胞不易傳得過稀，有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶，以具體細胞和經驗為準。（懸浮細胞）用移液管輕輕吹打瓶壁，直接將溶液吸入離心管離心即可。
7、貼壁細胞 ，懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時，換新的細胞培養瓶和換新鮮的培養液，37℃，5%CO2 培養。
特別提醒： 原瓶中培養基不宜繼續使用，請更換新鮮培養基培養。
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