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什么是液相色譜以及它是如何工作的
閱讀：2669 發布時間：2022-1-13
液相色譜按其分離機理，可分為四種類型：吸附色譜法、分配色譜法、離子交換色譜、凝膠色譜法。
液相色譜是一種色譜技術，用于分離和分析溶液中混合物的化學成分，以確定是否存在或不存在特定成分，如果存在，則存在多少。高效液相色譜（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）是使用高色譜分辨率進行高效分離的高性能分析。分離的組分也可以在檢測后使用餾分收集器分離，作為純化的手段。HPLC有多種不同的配置，可用于分離分子量從半揮發性小分子到幾萬千道爾頓的大蛋白生物分子的溶解組分。液相色譜法是一種非常流行的分析技術，廣泛用于環境監控，農業，醫藥領域。
流動相通常是溶劑，借助高壓泵將樣品輸送并且通過系統。它在分離過程中也起著至關重要的作用?；旌衔镏袑α鲃酉嗑哂休^高親和力的組分將快速遷移通過色譜柱，而與固定相之間幾乎沒有相互作用。當組分的帶離開色譜柱或從色譜柱洗脫時，檢測器將給出與組分濃度成正比的響應。進樣與檢測之間的時間稱為保留時間。對于一組給定的色譜條件，組分的保留時間將非常明確，可以與鑒定標準進行比較。
在反相色譜法中，極性較小的分析物會優先分配到非極性固定相中，并且保留時間更長。數據采集系統將檢測器響應記錄為色譜圖中保留時間的函數。通常對色譜圖中記錄的峰進行積分以確定峰面積，該峰面積與樣品中存在的組分的濃度成正比。
自動進樣器將樣品注入流動相后，在色譜柱中進行分離過程。色譜系統的選擇性對色譜分辨率的影響最大，應針對所研究的應用和組件進行定制。選擇性可以通過改變流動相（不同溶劑）或固定相中存在的特定化學官能團（改變色譜柱類型）的電化學強度來改變。