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P4066-pROKII-RNAI基因沉默質(zhì)粒
  • P4066-pROKII-RNAI基因沉默質(zhì)粒
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更新時間:2025-05-08 21:00:08

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pROKII-RNAI基因沉默質(zhì)粒
啟動子35s
終止子NOS
質(zhì)粒分類植物系列,RNAi載體
質(zhì)粒大小12880bp
原核抗性Kan
真核抗性G418
克隆菌株DH5α
培養(yǎng)條件37℃
表達(dá)宿主植物細(xì)胞
5'測序引物35S:GACGCACAATCCCACTATCC
3'測序引物根據(jù)序列設(shè)計(jì)引物
質(zhì)粒宿主植物
質(zhì)粒用途基因沉默
片段類型shRNA
原核抗性卡那霉素

一、載體構(gòu)建的基本實(shí)驗(yàn)步驟
(1)目的DNA片段和載體的制備;
(2)目的DNA片段和載體的連接;
(3)連接產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化;
(4)克隆篩選。
(5)測序驗(yàn)證及結(jié)果交付

 

二、詳細(xì)內(nèi)容
1、以PCR擴(kuò)增為基礎(chǔ)的各類載體構(gòu)建,如大腸桿菌表達(dá)載體、酵母表達(dá)載體、桿狀病毒表達(dá)載體、哺乳動物表達(dá)載體;報告基因載體等;
2、基因定點(diǎn)突變,包括單點(diǎn)突變,多點(diǎn)突變,基因缺失等;
3、載體元件替換和改造;
4siRNA載體和miRNA表達(dá)載體構(gòu)建;
5、過表達(dá)載體構(gòu)建。

 

pTRV2-Gateway基因沉默質(zhì)粒
pFGC5941基因沉默質(zhì)粒
AtU6-26-sgRNA-SK基因編輯質(zhì)粒
pCAMBIA35s-4×Myc-MCS-3×FLAG蛋白表達(dá)質(zhì)粒
pCAMBIA1305.1蛋白表達(dá)質(zhì)粒
pCAMBIA1303蛋白表達(dá)質(zhì)粒
pCAMBIA1301-35SN蛋白表達(dá)質(zhì)粒
pCAMBIA1300蛋白表達(dá)質(zhì)粒
pLVshRNA-EGFP(2A)Puro-Usp7-m-shRNA2基因沉默質(zhì)粒
pLVshRNA-EGFP(2A)Puro-Usp7-m-shRNA1基因沉默質(zhì)粒

 

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