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P4067-pTCK303-Stuffer基因沉默質粒
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更新時間:2025-05-08 21:00:08

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pTCK303-Stuffer基因沉默質粒
啟動子Ubi35s
復制子ori
終止子NOS
質粒分類植物系列,RNAi載體
原核抗性Kan
真核抗性Hyg
克隆菌株DH5α
培養條件37℃
表達宿主植物細胞
質粒宿主植物
質粒用途基因沉默
片段類型shRNA
原核抗性卡那霉素
真核抗性潮霉素

注意事項:轉化前請準確查找該質粒相應的抗生素名稱、抗生素使用濃度、感受態名稱和培養溫度。
1、收到質粒干粉后請先5000rpm離心1min,再加入20μl~50μl無菌水或 pH8.0  1*TE緩沖液來溶解質粒,室溫放置1min;

2、從-80冰箱中取出相應的感受態,置于冰盒上解凍,并做好標記;

3、取2μl質粒加至100μl感受態中,冰浴30min;

442熱激90s,再冰浴2min

5、加入900μl無抗的LB液體培養基,180rpm震蕩培養45min;

6、6000rpm離心5min,僅留100ul上清混勻菌體沉淀;

7、混勻后的菌液加至對應抗性的LB平板上,倒入適量玻璃珠,涂勻液體;

8、將平板正向培養1h,再倒置培養12h~16h;

9、挑取單克隆菌落至對應抗性的LB液體培養基中,震蕩培養12h~16h,根據實驗需要提取質粒

 

pROKII-RNAI基因沉默質粒
pTRV2基因沉默質粒
pTRV2-Gateway基因沉默質粒
pFGC5941基因沉默質粒
AtU6-26-sgRNA-SK基因編輯質粒
pCAMBIA35s-4×Myc-MCS-3×FLAG蛋白表達質粒
pCAMBIA1305.1蛋白表達質粒
pCAMBIA1303蛋白表達質粒
pCAMBIA1301-35SN蛋白表達質粒
pCAMBIA1300蛋白表達質粒

 

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