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P22520-pET-12a蛋白表達質粒
  • P22520-pET-12a蛋白表達質粒
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更新時間:2025-05-08 21:00:08

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pET-12a蛋白表達質粒
啟動子T7
復制子pBR322
克隆菌株DH5a
培養條件37度
質粒宿主大腸桿菌
質粒用途蛋白表達
片段類型ORF
片段物種空載體
原核抗性Amp

注意事項:轉化前請準確查找該質粒相應的抗生素名稱、抗生素使用濃度、感受態名稱和培養溫度。
1、收到質粒干粉后請先5000rpm離心1min,再加入20μl~50μl無菌水或 pH8.0  1*TE緩沖液來溶解質粒,室溫放置1min;

2、從-80冰箱中取出相應的感受態,置于冰盒上解凍,并做好標記;

3、取2μl質粒加至100μl感受態中,冰浴30min;

4、42熱激90s,再冰浴2min

5、加入900μl無抗的LB液體培養基,180rpm震蕩培養45min;

66000rpm離心5min,僅留100ul上清混勻菌體沉淀;

7、混勻后的菌液加至對應抗性的LB平板上,倒入適量玻璃珠,涂勻液體;

8、將平板正向培養1h,再倒置培養12h~16h;

9、挑取單克隆菌落至對應抗性的LB液體培養基中,震蕩培養12h~16h,根據實驗需要提取質粒

 

pLVX-CMV-HA-MYC(human)-PGK-Puro蛋白表達質粒
pLVshRNA-EGFP(2A)Puro-HMGA1(human)-shRNA2基因沉默質粒
pLVshRNA-EGFP(2A)Puro-HMGA1(human)-shRNA1基因沉默質粒
pLVshRNA-EGFP(2A)Puro-HMGA1(human)-shRNA3基因沉默質粒
pCDH-CMV-MCS-Myc-EF1-CopGFP-T2A-Puro蛋白表達質粒
pYX212-SMF1(yeast)蛋白表達質粒
pCAMBIA1300-35S-EGFP蛋白表達質粒
pLentiCRISPRV2-GSDME(mouse)-sgRNA2基因編輯質粒
pLentiCRISPRV2-GSDME(mouse)-sgRNA1基因編輯質粒
pInducer10-mir-RUP-PheS基因沉默,誘導質粒

 

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