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上海禾午生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第4年

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P16562-pLVX-CMV-IRES-EGFP-Puro蛋白表達(dá)質(zhì)粒
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pLVX-CMV-IRES-EGFP-Puro蛋白表達(dá)質(zhì)粒
啟動(dòng)子CMV
復(fù)制子pUC
克隆菌株Stbl3
培養(yǎng)條件37度
質(zhì)粒宿主哺乳細(xì)胞,慢病毒
質(zhì)粒用途蛋白表達(dá)
片段類型ORF
片段物種空載體
原核抗性Amp
真核抗性Puro
熒光標(biāo)記綠色

一、載體構(gòu)建的基本實(shí)驗(yàn)步驟
(1)目的DNA片段和載體的制備;
(2)目的DNA片段和載體的連接;
(3)連接產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化;
(4)克隆篩選。
(5)測(cè)序驗(yàn)證及結(jié)果交付

 

二、詳細(xì)內(nèi)容
1、以PCR擴(kuò)增為基礎(chǔ)的各類載體構(gòu)建,如大腸桿菌表達(dá)載體、酵母表達(dá)載體、桿狀病毒表達(dá)載體、哺乳動(dòng)物表達(dá)載體;報(bào)告基因載體等;
2、基因定點(diǎn)突變,包括單點(diǎn)突變,多點(diǎn)突變,基因缺失等;
3、載體元件替換和改造;
4siRNA載體和miRNA表達(dá)載體構(gòu)建;
5、過表達(dá)載體構(gòu)建。

 

pLentiCRISPRV2-Trpc6-sgRNA1(mouse)基因編輯質(zhì)粒
pLVX-EGFP-Puro蛋白表達(dá)質(zhì)粒
pLVX-CMV-IRES-EGFP-Puro蛋白表達(dá)質(zhì)粒
pLVshRNA-EGFP(2A)Puro-TRIM21-shRNA1(human)基因沉默質(zhì)粒
pLVshRNA-EGFP(2A)Puro-FTO-shRNA1(mouse)基因沉默質(zhì)粒
pLH-sgRNA1-2XMS2基因編輯質(zhì)粒
pCDH-EF1-MCS-PGK-Puro蛋白表達(dá)質(zhì)粒
pAAV-MCS-mCherry-T2A-Luc蛋白表達(dá)質(zhì)粒
pMG36e-hALDH2(human)蛋白表達(dá)質(zhì)粒
pLentiCRISPRV2-Trpv2-sgRNA1(mouse)基因編輯質(zhì)粒

 

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