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P15000-pLH-sgRNA1-boxB-MS2-PP7基因編輯質粒
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更新時間:2025-05-08 21:00:08

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pLH-sgRNA1-boxB-MS2-PP7基因編輯質粒
別名Plasmid #75397
啟動子U6
復制子pUC
克隆菌株DB3.1
培養條件37度
質粒宿主哺乳細胞,慢病毒
質粒用途基因編輯
片段類型CRISPR,sgRNA
原核抗性Amp
真核抗性Hyg,ccdB

注意事項:轉化前請準確查找該質粒相應的抗生素名稱、抗生素使用濃度、感受態名稱和培養溫度。
1、收到質粒干粉后請先5000rpm離心1min,再加入20μl~50μl無菌水或 pH8.0  1*TE緩沖液來溶解質粒,室溫放置1min

2、從-80冰箱中取出相應的感受態,置于冰盒上解凍,并做好標記;

3、取2μl質粒加至100μl感受態中,冰浴30min

442熱激90s,再冰浴2min

5、加入900μl無抗的LB液體培養基,180rpm震蕩培養45min

66000rpm離心5min,僅留100ul上清混勻菌體沉淀;

7、混勻后的菌液加至對應抗性的LB平板上,倒入適量玻璃珠,涂勻液體;

8、將平板正向培養1h,再倒置培養12h~16h

9、挑取單克隆菌落至對應抗性的LB液體培養基中,震蕩培養12h~16h,根據實驗需要提取質粒

 

pLVshRNA-EGFP(2A)Puro-CSTF2-shRNA1(human)基因沉默質粒
pLVshRNA-EGFP(2A)Puro-NOTCH1-shRNA1(human)基因沉默質粒
pAAV-U6-sgRNA-CMV-GFP基因編輯質粒
pLVshRNA-EGFP(2A)Puro-TRIM32-shRNA2(human)基因沉默質粒
Tet-pLKO-Puro-CDC42-shRNA2(human)基因沉默,誘導質粒
pLVshRNA-EGFP(2A)Puro-TRIM32-shRNA1(human)基因沉默質粒
pLVshRNA-EGFP(2A)Puro-TRIM21-shRNA2(human)基因沉默質粒
pLVshRNA-EGFP(2A)Puro-KCTD17-shRNA1(human)基因沉默質粒
pLVshRNA-EGFP(2A)Puro-CCT8-shRNA2(human)基因沉默質粒
pLVshRNA-EGFP(2A)Puro-CCT8-shRNA1(human)基因沉默質粒

 

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