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上海禾午生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第4年

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P1019-pSPT18基因模板質(zhì)粒
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pSPT18基因模板質(zhì)粒
啟動(dòng)子T7 promoter
復(fù)制子PBR322 ori
質(zhì)粒分類大腸桿菌載體;克隆質(zhì)粒
質(zhì)粒大小3104bp
原核抗性Amp
克隆菌株DH5α
培養(yǎng)條件37℃
表達(dá)宿主BL21(DE3)
培養(yǎng)條件37℃,有氧,LB
質(zhì)粒宿主大腸桿菌
質(zhì)粒用途基因模板
片段類型基因CDS
片段物種空載體
原核抗性氨芐青霉素

一、載體構(gòu)建的基本實(shí)驗(yàn)步驟
(1)目的DNA片段和載體的制備;
(2)目的DNA片段和載體的連接;
(3)連接產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化;
(4)克隆篩選。
(5)測(cè)序驗(yàn)證及結(jié)果交付

 

二、詳細(xì)內(nèi)容
1、以PCR擴(kuò)增為基礎(chǔ)的各類載體構(gòu)建,如大腸桿菌表達(dá)載體、酵母表達(dá)載體、桿狀病毒表達(dá)載體、哺乳動(dòng)物表達(dá)載體;報(bào)告基因載體等;
2、基因定點(diǎn)突變,包括單點(diǎn)突變,多點(diǎn)突變,基因缺失等;
3、載體元件替換和改造;
4siRNA載體和miRNA表達(dá)載體構(gòu)建;
5、過(guò)表達(dá)載體構(gòu)建。

 

pSP73基因模板質(zhì)粒
pGEM-3Zf(+)基因模板質(zhì)粒
pGEN-MCS基因模板質(zhì)粒
pACYC177基因模板質(zhì)粒
pET28a-IL36a-m蛋白表達(dá)質(zhì)粒
pMD19-Control基因模板質(zhì)粒
pMD18-Control基因模板質(zhì)粒
Nme2sgRNA_pLKO基因編輯質(zhì)粒

 

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