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P0385-pET28a-PPK蛋白表達質粒
  • P0385-pET28a-PPK蛋白表達質粒
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地: 上海

更新時間:2025-05-08 21:00:08

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pET28a-PPK蛋白表達質粒
啟動子T7
復制子ori,F1 ori
終止子T7 terminator
質粒分類基因文庫質粒;其它基因質粒;其它種源質粒
質粒大小7297bp
質粒標簽C-6×His
原核抗性Kan
克隆菌株DH5α
培養條件37℃
表達宿主BL21(DE3)大腸桿菌
培養條件37℃,有氧,LB
誘導方式IPTG或乳糖及其類似物
質粒宿主大腸桿菌

注意事項:轉化前請準確查找該質粒相應的抗生素名稱、抗生素使用濃度、感受態名稱和培養溫度。
1、收到質粒干粉后請先5000rpm離心1min,再加入20μl~50μl無菌水或 pH8.0  1*TE緩沖液來溶解質粒,室溫放置1min

2、從-80冰箱中取出相應的感受態,置于冰盒上解凍,并做好標記;

3、取2μl質粒加至100μl感受態中,冰浴30min

442熱激90s,再冰浴2min

5、加入900μl無抗的LB液體培養基,180rpm震蕩培養45min

66000rpm離心5min,僅留100ul上清混勻菌體沉淀;

7、混勻后的菌液加至對應抗性的LB平板上,倒入適量玻璃珠,涂勻液體;

8、將平板正向培養1h,再倒置培養12h~16h

9、挑取單克隆菌落至對應抗性的LB液體培養基中,震蕩培養12h~16h,根據實驗需要提取質粒

 

pET21a-beta subunit-beta' subunit蛋白表達質粒
pGH-ADH2基因模板質粒
pGADT7-GW雜交質粒
pGBKT7-GW雜交質粒
pGEM-4Z基因模板質粒
pBV220-mCherry蛋白表達質粒
pLentiCRISPRV2-DHODH-sgRNA3(human)基因編輯質粒
pLentiCRISPRV2-CRACD-sgRNA1(human)基因編輯質粒
pLentiCRISPRV2-CRACD-sgRNA3(human)基因編輯質粒
pDONR201基因模板質粒

 

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