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一、載體構建的基本實驗步驟
(1)目的DNA片段和載體的制備；
(2)目的DNA片段和載體的連接；
(3)連接產物的轉化；
(4)克隆篩選。
(5)測序驗證及結果交付
二、詳細內容
1、以PCR擴增為基礎的各類載體構建，如大腸桿菌表達載體、酵母表達載體、桿狀病毒表達載體、哺乳動物表達載體；報告基因載體等；
2、基因定點突變，包括單點突變，多點突變，基因缺失等；
3、載體元件替換和改造；
4、siRNA載體和miRNA表達載體構建；
5、過表達載體構建。
| pLVshRNA-U6-RAB11FIP2(mouse)-shRNA3-PGK-EGFP-E2A-Puro基因沉默質粒 |
| pLVshRNA-U6-ARID3A(human)-shRNA3-PGK-EGFP-E2A-Puro基因沉默質粒 |
| pLVX-CMV-PD-1(mouse)-PGK-Puro蛋白表達質粒 |
| pDNR-LIB-Hspa2(mouse)基因模板質粒 |
| pLVshRNA-U6-IQGAP1(mouse)-shRNA1-PGK-EGFP-E2A-Puro基因沉默質粒 |
| pLKO.1-EGFP-Puro-CAV1(human)-shRNA1基因沉默質粒 |
| pLKO.1-EGFP-Puro-CLTA(human)-shRNA2基因沉默質粒 |
| pLKO.1-KRAS(human)-shRNA1基因沉默質粒 |
| pLKO.1-KRAS(human)-shRNA2基因沉默質粒 |
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