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上海禾午生物科技有限公司
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P68063-pCMV-mCherry-Hdac9(mouse)-Neo
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名稱(chēng)pCMV-mCherry-Hdac9(mouse)-Neo
別稱(chēng)NM_001271386.1;AV022454; D030072B18Rik; HD7B; HD9; Hdac7b;HDRP; Mitr; mKIAA0744
質(zhì)粒宿主哺乳細(xì)胞
質(zhì)粒用途蛋白表達(dá)

名稱(chēng)pCMV-mCherry-Hdac9(mouse)-Neo
別稱(chēng)NM_001271386.1;AV022454; D030072B18Rik; HD7B; HD9;   Hdac7b;HDRP; Mitr; mKIAA0744
基因長(zhǎng)3267bp
質(zhì)粒宿主哺乳細(xì)胞
質(zhì)粒用途蛋白表達(dá)
片段類(lèi)型ORF
片段物種小鼠
原核抗性Amp
篩選標(biāo)記Neo/G418
熒光標(biāo)記紅色
啟動(dòng)子CMV
復(fù)制子pUC
感受態(tài)DH5a
溫度37度
背景載體pCMV-mCherry-2×Linker-MCS-Neo
正向引物MCHERRY-F



注意事項(xiàng):轉(zhuǎn)化前請(qǐng)準(zhǔn)確查找該質(zhì)粒相應(yīng)的抗生素名稱(chēng)、抗生素使用濃度、感受態(tài)名稱(chēng)和培養(yǎng)溫度。


1
、收到質(zhì)粒干粉后請(qǐng)先5000rpm離心1min,再加入20μl~50μl無(wú)菌水或 pH8.0 1*TE緩沖液來(lái)溶解質(zhì)粒,室溫放置1min

2
、從-80冰箱中取出相應(yīng)的感受態(tài),置于冰盒上解凍,并做好標(biāo)記;

3
、取2μl質(zhì)粒加至100μl感受態(tài)中,冰浴30min

4
42熱激90s,再冰浴2min

5
、加入900μl無(wú)抗的LB液體培養(yǎng)基,180rpm震蕩培養(yǎng)45min

6
6000rpm離心5min,僅留100ul上清混勻菌體沉淀;

7
、混勻后的菌液加至對(duì)應(yīng)抗性的LB平板上,倒入適量玻璃珠,涂勻液體;

8
、將平板正向培養(yǎng)1h,再倒置培養(yǎng)12h~16h

9
、挑取單克隆菌落至對(duì)應(yīng)抗性的LB液體培養(yǎng)基中,震蕩培養(yǎng)12h~16h,根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要提取質(zhì)粒



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