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人蛋白酪氨酸激酶(PTK)ELISA試劑盒

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更新時(shí)間:2021-06-23 13:51:35瀏覽次數(shù):708

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 96T
應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè) 主要用途 科研
人蛋白酪氨酸激酶(PTK)ELISA試劑盒 應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人蛋白酪氨酸激酶(PTK)表達(dá)。用純化的人蛋白酪氨酸激酶(PTK)抗體包被微孔板,制成固相抗體,可與樣品中蛋白酪氨酸激酶(PTK)相結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗原和其他成分后再與HRP標(biāo)記的蛋白酪氨酸激酶(PTK)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。

詳細(xì)介紹

人蛋白酪氨酸激酶(PTK)ELISA試劑盒 使用目的:

本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中蛋白酪氨酸激酶(PTK)表達(dá)。

實(shí)驗(yàn)原理

人蛋白酪氨酸激酶(PTK)ELISA試劑盒 應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人蛋白酪氨酸激酶(PTK)表達(dá)。用純化的人蛋白酪氨酸激酶(PTK)抗體包被微孔板,制成固相抗體,可與樣品中蛋白酪氨酸激酶(PTK)相結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗原和其他成分后再與HRP標(biāo)記的蛋白酪氨酸激酶(PTK)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標(biāo)本中人蛋白酪氨酸激酶(PTK)的存在與否。

試劑盒組成

1

30倍濃縮洗滌液

20ml×1瓶

7

終止液

6ml×1瓶

2

酶標(biāo)試劑

6ml×1瓶

8

陽(yáng)性對(duì)照

0.5ml×1瓶

3

酶標(biāo)包被板

12孔×8條

9

陰性對(duì)照

0.5ml×1瓶

4

樣品稀釋液

6ml×1瓶

10

說(shuō)明書(shū)

1份

5

顯色劑A液

6ml×1瓶

11

封板膜

2張  

6

顯色劑B液

6ml×1/瓶

12

密封袋

1個(gè)

標(biāo)本要求 

1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。

操作步驟

  • 編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照2孔、陽(yáng)性對(duì)照2孔、空白對(duì)照1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)

 

 

  • 加樣:分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照50μl。然后在待測(cè)樣品孔先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,
  • 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
  • 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
  • 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
  • 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
  • 溫育:操作同3。
  • 洗滌:操作同5。
  • 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
  • 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
  • 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

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