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產(chǎn)品分類品牌分類

血清系列: SERANA胎牛血清低內(nèi)毒素膠原蛋白 ZETA LIFE胎牛血清

細胞轉染: 活體轉染試劑 LIPO3000轉染試劑高效轉染試劑

支原體清除: 支原體去除試劑

細胞凍存: 無血清細胞凍存液

實驗耗材: 多功能開關器封板膜 PCR & qPCR 孔板 qPCR耗材 PCR耗材

分子試劑: RNA提取等溫擴增克隆突變 PCR系列核酸提取純化核酸染料

細胞增殖與凋亡: 細胞凋亡檢測試劑盒細胞增殖及毒性檢測

Biozellen系列: 鼠尾膠原蛋白 3D基質膠

培養(yǎng)基: 內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基細胞添加劑無血清培養(yǎng)基

ELISA試劑盒: 豬ELISA試劑盒小鼠ELISA試劑盒

TOYOBO（東洋紡）: PCR相關試劑

ZYMO RESEARCH: 試劑盒

Greiner（格瑞納）: 細胞培養(yǎng)小室

IKA（艾卡）: 刀頭

化學發(fā)光底物（ECL）: ECL化學發(fā)光液

PROSPEC系列: 單胺氧化酶

Epigentek系列: 細胞分析試劑盒

微生物檢測: 生化鑒定試劑盒

細胞生物學: 細胞輔助試劑細胞檢測試劑

Corning康寧: 凍存管嵌套/小室

解離試劑: 胰蛋白酶

細胞類-實驗耗材: 細胞培養(yǎng)瓶細胞培養(yǎng)皿細胞培養(yǎng)板

原代細胞: 小鼠原代細胞

植物檢測系列試劑盒: 植物激素系列植物氧化與抗氧化系列植物氮代謝系列植物脂肪酸代謝系列植物固氮作用系列植物呼吸作用系列植物光合作用檢測試劑盒

SERANA: BSA

細胞系: 人源細胞系

生化試劑盒

環(huán)境檢測系列試劑盒（AKEN）: 土壤氧化還原酶系列

類器官培養(yǎng): 培養(yǎng)試劑盒

緩沖器和解決方案: 抗生素培養(yǎng)添加物隱窩增強劑保護液洗滌液凍存液解離液

生物三凝膠基質: 細胞外基質

細胞因子分子: 抑制劑激動劑

生物樣本庫: 類器官

蛋白研究系列: 蛋白緩沖 ALP發(fā)光液 ECL系列轉印膜轉膜封閉 PAGE凝膠試劑盒蛋白電泳蛋白制備免疫檢測

修飾檢測試劑盒: 蛋白修飾檢測試劑盒

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免疫熒光技術-間接法

時間：2021/10/26閱讀：2075

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材料與儀器：

抗體
PBS 伊文氏蘭
顯微鏡

實驗步驟：

1. 標本固定后，PBS洗滌3x3 分鐘；

2. 滴加一抗，37 ℃40 分鐘或4 ℃過夜；

3. PBS洗3x3 分鐘；

4. 滴加熒光標記二抗37 ℃，40 分鐘；

5. PBS洗3x3 分鐘；

6. 0.1 %伊文氏蘭復染；

7. PBS洗3x3 分鐘；

8. 緩沖甘油封片，鏡檢。

要點：

1.種屬在進行雙重免疫標記時，要選擇來源于兩種不同種屬動物的一抗，如選擇來源于rabbit和mouse的抗體，二抗則用帶有不同熒光素標記的，如抗rabbit或抗mouse二抗， FITC和Tex-Red;

2.孵育時間和溫度相同的兩種一抗可以同時孵育，然后加入相對應的一抗的二抗進行孵育，一抗孵育時間室溫至少需要16h,二抗孵育室溫不宜超過4h,選擇4℃孵育比較好，背景比較清晰，另外孵育時夏天特別注意室溫溫度；

3.抗體稀釋液通常第一抗體選擇1%牛血清白蛋白進行稀釋，第二抗體選擇用0.01mol/L的PBS稀釋。

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