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深圳市安培生物科技有限公司
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大鼠主動脈平滑肌細胞培養實驗——貼塊法

時間:2021/12/4閱讀:1510
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材料與儀器

SD大鼠
PBS FBS DMEM
手術剪 手術鉗 眼科剪刀 眼科鑷子 大頭針 手術刀 培養皿

步驟

一、實驗步驟

1. SD 大鼠(150-200 g),斷頭,浸入75%的酒精中15 min。

2. 置入超凈臺中,將大鼠固定于殺鼠板上,在無菌條件下打開腹腔,分離出胸主動脈、腹主動脈, 摘出。

3. PBS 清洗3 遍,剝去外膜,用手術刀片刮去內膜,留下中膜并將其移入1 mL 的培基中、剪成1x1 mm2 大小組織塊。

4. 再將PBS清洗組織塊,移入25 mL 的培養瓶中,用尖嘴彎管均勻貼好組織塊,放入37℃、5% CO2的培養箱倒置培養6 小時后,待組織塊貼壁后,再加入2.5 mL 培養液后放回培養箱中。

5. 隨后每3 天予以全量換液。

二、結果

3-5 天后可見組織塊周圍有細胞爬出,大約2 周后80-90%融合。


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