SH-SY5Y 人神經(jīng)母細胞瘤細胞

產(chǎn)品基本信息

產(chǎn)品編號：KMCC-001-0052

細胞名稱：SH-SY5Y 人神經(jīng)母細胞瘤細胞

英文名稱：Human Neuroblastoma Cells

別稱： SHSY5Y，SHSY-5Y，SH-Sy5y，SK-SH-SY5Y，SY5Y

種屬來源：人

組織來源：腦神經(jīng)母細胞瘤，轉(zhuǎn)移部位骨髓

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

生長特性：半貼壁生長（貼壁和懸浮同時存在）

培養(yǎng)基：43% MEM 培養(yǎng)基 + 43% F12 培養(yǎng)基 +10% FBS + 1% NEAA(非必需氨基酸) + 1% 丙酮酸鈉 + 1% GlutaMAX-1 + 1% PS（備注：該細胞培養(yǎng)時貼壁細胞與懸浮細胞同時存在，均為正常形態(tài)的活細胞，換液和傳代時需要分別回收貼壁和懸浮細胞。）

生長條件：氣相：95%空氣、5%二氧化碳；溫度：37℃；濕度：70~80%

傳代方法：1:2至1:3，每周 2~3次

凍存條件：采用細胞凍存液，梯度降溫，液氮儲存

細胞用途：僅供研究之用

人神經(jīng)母細胞瘤建系于1970年,是神經(jīng)母細胞瘤SK-N-SH細胞系經(jīng)三次克隆后的亞系(SK-N-SH→SH-SY→SH-SY5→SH-SY5Y)。據(jù)報道SH-SY5Y細胞的飽和密度大于1000000個/cm2,細胞表達中等的多巴胺β羥化酶活性。經(jīng)本庫STR檢測結(jié)果無誤。STR結(jié)果如下：Amelogenin: X；CSF1PO: 11；D13S317: 11；D16S539: 8,13；D5S818: 12；D7S820: 7,10；THO1: 7,10；TPOX: 8,11；vWA: 14,18

產(chǎn)品編號：KMCC-001-1384

細胞名稱：HPT-8 人飼養(yǎng)層上皮細胞

英文名稱：Human Feeder Epithelial Cells

別稱：HPT8，人滋養(yǎng)層上皮細胞

種屬來源：人

組織來源：表皮

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

生長特性：貼壁生長

培養(yǎng)基：89% RPMI-1640 培養(yǎng)基 + 10% FBS + 1%雙抗

生長條件：氣相：95%空氣、5%二氧化碳；溫度：37℃；濕度：70~80%

傳代方法：1:2至1:3，每周 2~3次

凍存條件：細胞凍存液：80%培養(yǎng)基 + 10%血清 + 10%DMSO，梯度降溫，液氮儲存

細胞用途：僅供研究之用

細胞名稱：ES-E14TG2a 小鼠胚胎干細胞

英文名稱：Mouse Embryonic Stem Cells

別稱：ESE14TG2a

種屬來源：小鼠

組織來源：胚胎

細胞形態(tài)：球形克隆細胞樣

生長特性：貼壁生長

培養(yǎng)基：DMEM 培養(yǎng)基 + 15% ES級 FBS + 1% L-Glu + 1% NEAA + 1% 丙酮酸鈉 + 1uL/mL beta- Mer + 0.1uL/mL LIF + 1% 雙抗

生長條件：氣相：95%空氣、5%二氧化碳；溫度：37℃；濕度：70~80%

傳代方法：1:2至1:3，每周 2~3次

凍存條件：采用細胞凍存液，梯度降溫，液氮儲存

細胞用途：僅供研究之用

細胞培養(yǎng)操作

1. 凍存細胞的復(fù)蘇

1.1 在超凈臺中取配好的*培養(yǎng)液5ml到15ml離心管中放至室溫備用。

1.2 快速將干冰或液氮保存的細胞株，放入37℃的水浴鍋后不停晃動凍存管，使其解凍并達到37℃，此過程盡量保持在3分鐘內(nèi)完成。（備注：此處注意，管身或管內(nèi)的液氮揮發(fā)完后才可放入，否則有炸裂風(fēng)險）

1.3 將化凍的細胞液快速轉(zhuǎn)移至上述準(zhǔn)備好培養(yǎng)基中，1000rpm 、4min離心收集細胞并傳代，傳代方法如下：

2. 細胞傳代處理

2.1 待長滿瓶底至80%以上時，貼壁細胞棄掉培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用1X PBS洗兩遍。

2.2 加1mL 0.25%的胰酶溶液，置于37℃培養(yǎng)箱中消化2-3分鐘，直至看到有細胞從瓶底上脫落分離。

2.3 加入2mL*培養(yǎng)基終止消化，輕輕吹打?qū)⑺屑毎麖呐囵B(yǎng)瓶表面吹落并轉(zhuǎn)移到離心管中，1000rpm 、4min離心收集細胞。

2.4 收集好的細胞用*培養(yǎng)基重懸，并輕輕吹打懸浮，若無特別說明，就按1:2~1:3的比例鋪新的培養(yǎng)瓶，放進培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)（每個細胞培養(yǎng)條件不同，大部分細胞5%CO2、37℃恒溫培養(yǎng)）。

3.細胞凍存處理

3.1 收集方法同上，

3.2 收集好的細胞用細胞凍存液（若無特殊說明，一般細胞凍存液成分為：10%血清+80%培養(yǎng)基+10%DMSO）懸浮，并按4℃、1h，-20℃、30min，-80℃過夜，液氮長期的溫度梯度進行保存。

細胞功能研究相關(guān)檢測：

2D細胞培養(yǎng)和觀察

3D細胞培養(yǎng)和觀察

原代細胞分離/培養(yǎng)/鑒定

細胞增殖/毒性檢測（MTT 法/CCK8 法）

細胞凋亡檢測（AnnexinV FITC/PI雙染流式法/Tunel法）

細胞周期檢測（PI染料標(biāo)記流式法）

細胞遷移/侵襲檢測（劃痕法/Transwell法）

流式細胞分選（流式細胞術(shù)）

細胞免疫熒光檢測

小管形成實驗（tube formation，體外血管生成實驗）

細胞克隆形成實驗

細胞外泌體分離與鑒定

慢病毒包裝及穩(wěn)轉(zhuǎn)株篩選

電生理檢測

個性化細胞實驗（藥物篩選等）

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