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熒光定量PCR儀的通道分類與選購指南

閱讀:8705        發布時間:2021-8-16

隨著醫療器械與電子技術的深度結合,使得熒光定量PCR在各個領域,包括人類身份鑒定病原體檢測、產前診斷、藥物療效考核、腫瘤基因檢驗都有廣泛應用。各大醫院、科研機構、實驗室等場所都隨處可見,但是,他們選購熒光定量PCR時可能會遇到這樣的問題:到底選購幾通道的合適呢?

先先帶大家了解一下什么是所謂的通道呢?

顧名思義,通道(channel)指的是針對每一種熒光的檢測器,比如你在一個管中做多個顏色,針對多個靶基因。每個顏色需要一個檢測器來檢測熒光信號的強弱,每一個針對不同顏色的檢測器,就是一個通道。

目前市面上大部分熒光定量PCR儀在設計時已經固定了熒光通道數,因此大家在選擇儀器時會比較慎重,通道數選少了擔心無法滿足后續新的實驗應用;通道數選多了一是擔心購置預算不足,二是擔心某些通道可能一直閑置,用不上,造成資源浪費。

 

 

正因為每個光學卡夾都是一套獨立的光路,因此您可以根據實驗室的當前的購置預算以及實驗應用需求選擇單、雙、三、四、五或六個熒光通道。如果未來有新的實驗應用,也只需要添加相應的卡夾即可實現升級,實驗室人員自己就可以進行安裝

除了在通道選擇上的靈活性,
帶有卡夾式光路設計熒光定量分析儀的好處還在于:每個卡夾都針對特定的波段進行了優化,因此針對特定的染料的檢測效果。

此外,每個卡夾有8個光源和檢測器,對應96孔板的一列,檢測時以一列即8孔為單位進行,相較于單孔檢測的方式,速度會更快。卡夾排列于卡夾盒中,檢測時所有卡夾在卡夾盒中移動完成對96孔板的信號收集,完成96孔板6個通道的一次信號采集時間小于3秒,因此也可以大大縮短多重PCR的時間。

目前市面上生產熒光定量PCR 的廠家非常多,如何選擇合適的熒光定量儀器也變得非常重要。面對性能不同的產品,選購商品時也變得眼花繚亂起來。這時,就有人一不下心走進了“選購誤區”。

 

在使用有些廠家5通道的熒光定量儀時,為了確保實驗結果的精確性和準確性都要在實驗中使用ROX(一種熒光染料)或的Referencedye,這些熒光染料都必須單獨使用一個檢測通道。

這樣以來,真正能檢測多重PCR熒光信號的有效通道只有4個,而且使用校正染料可能會增加后期的使用成本。有的熒光定量PCR的檢測通道是只為自已廠家的的熒光染料或試劑開放的,有效檢測通道也絕非像宣傳資料中宣稱的那么多。在購買前確認熒光定量PCR儀器的有效檢測通道尤為重要,不能單單只聽宣傳。

考慮多重熒光定量PCR的通道數的時候也應該從實驗室實際情況出發,多重PCR并非人人適用、人人可用,因為它使實驗復雜化了。

熒光定量pcr儀的使用也應征求實驗科研人員的建議,畢竟真正使用器械做實驗的還是他們。

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