您好, 歡迎來到化工儀器網
凍存管安全使用須知
閱讀：904 發布時間：2021-8-16
使用凍存管儲存樣本時，嚴格要求應把凍存管放入液氮的氣相層或冰箱中保存！如果凍存管儲存于液氮液體中，液氮有一定幾率會滲入凍存管內部，復蘇時液氮氣化導致管內外壓力不平衡，這樣極易造成凍存管的炸裂，并具有生物危害性。
操作凍存管復蘇，全程使用安全防護設備，建議穿實驗服、戴棉質手套且在安全的實驗臺上進行操作。條件允許情況下，請佩戴護目鏡或防護面罩。由于夏季室內溫度會高于冬季，請格外小心。
凍存細胞儲存過程中，凍存管的冷凍溫度須均勻。不均勻的受凍將會導致冰塞的產生，冰塞會抑制兩側的液體溫度傳遞進而產生危險的高壓力并導致凍存管受損。
凍存的樣本量不要超過凍存管要求的工作體積。
凍存管使用不當， 會有爆、生物安全威脅及人身傷害等風險。
細胞凍存流程
用預熱過的 PBS 對細胞進行沖洗，棄去 PBS 后，加入含 EDTA的胰酶消化液對細胞進行消（薄地覆蓋表面即可，濃度須 根據不同的細胞系進行調整）。37 ℃消化 細胞 3–5分鐘，不可過度消化。一旦細胞從底部脫離，即可用含血清培養基終止消化并吸管輕吹打以重懸細胞 。離心細胞重懸液，棄上清。用適當體積含血培養基 重懸細胞。將細胞重懸液以 1:11 比例與凍存液 進行混合后轉移至凍存管中。細胞的濃度應為 1–5 ×106 細胞 /ml。含有細胞的凍存管須按照1度/min的冷卻速率進行凍。將凍存管插在含異丙醇的凍存盒小室并放置在 -70 ℃的冰箱中可以實現上述要求。如果凍存液中含有其他類型的樣品時，則需要將凍存管在 .20 ℃，-70 ℃或者液氮的氣相層進行直接凍存。