苯基色譜柱是苯基通過碳鏈連接鍵合于硅膠基質上。連接的碳鏈以3個C較常見，還有一些采用4個或者更多的碳鏈來鍵合。4個或者更多的碳鏈連接在某種程度上可以使苯環與被分析芳香化合物苯環能夠更好地接觸。
苯基鍵合相由于碳鏈的存在，所以具有一定的疏水保留能力，而苯環的存在又為芳香化合物提供了較佳的選擇性。
因為苯環可以與芳香化合物之間形成π-π相互作用，從而提供了與C18不同的選擇性。而對于苯環上含有吸電子基團的化合物，苯基柱的保留很強。
苯基色譜柱的使用：
苯基相為π-堿性（給電子），與烷基相和EPG相的總保留時間相似，便于色譜柱篩選。苯基相的交替選擇性通常由通過苯環可得到的π-π相互作用來解釋。對苯基相表現出差異選擇性的化合物包括：
1、疏水堿（TCAs、四環素類）；
2、中度堿（麻醉劑和麻醉性鎮痛藥）；
3、苯二氮卓類；
4、一些酸性化合物如ACE抑制劑和喹啉類抗生素；
5、核苷（例如胞苷)；
6、硝基、疊氮化物和磺酰基化合物。
苯基色譜柱的選擇性與C18（ODS）相反。分析堿性藥物時，苯基色譜柱得到的峰形良好。廣泛用于酸、堿和中性樣品的分析，對于酸和堿可得到相似的結果，且峰形均很好。
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