如何減少柱外體積
發布時間：2022-09-09
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視頻簡介
第一，進樣體積。要確保把進樣體積控制在最小。
第二，樣品溶劑。盡量保持樣品的溶劑強度等于或小于初始流動相。如果必須使用*的有機溶劑作為樣品溶劑，那么要盡可能減少進樣量。
第三，柱前管路。需要確保您使用的是最小內徑的管路。請注意，在樣品流路中使用幾種不同內徑的管路可能會導致額外的擴散。對于梯度分離，通常可以忽略柱前管路對柱外體積的影響，但是，這個體積會對梯度延遲體積有影響。
第四，熱交換器體積。有些儀器有不同體積的熱交換器可供選擇。當使用高柱溫時，這有助于使流動相與色譜柱之間的溫度相匹配。您需要使用與流速一致的最小體積的熱交換器，特別是對于2.1mm內徑色譜柱。
第五，柱后管路。需要確保您使用的是最小內徑的管路。請注意，在樣品流路中使用幾種不同內徑的管路可能會導致額外的擴散。對于20-50mm 2.1mm內徑的色譜柱，75或100μm內徑的管路可能會提供更好的結果，但是這會產生更高背壓。
第六，流通池體積。對于2.1mm和3mm內徑的色譜柱，通常使用1-5μl的流通池。更大的流通池通常用于4.6mm內徑更長的色譜柱。常規HPLC儀器的優化
如果您沒有UHPLC儀器，不用擔心。您可以通過以下幾個方面來優化您的系統以獲得更高的性能。
當在常規的HPLC儀器上使用高效的SPP色譜柱（如HALO）時，我們建議您按照以下幾個步驟進行系統優化。先從簡單、便宜的優化開始，然后根據需要再進行更復雜和更昂貴的優化。一旦您取得了可以接受的結果，您可以選擇放棄后續的優化。
第一，減少檢測器的響應時間，提高數據采集頻率。將檢測器響應時間設置為小于0.1秒，并且數據采集頻率大于20Hz。
第二，將進樣體積減少到最小，并確保能達到可接受的峰值響應。
第三，確保樣品溶劑強度比流動相弱。如果這不能滿足，那么需要對您的進樣體積有所限制。如果是梯度分離，那么您能夠注入比等度分離更多的樣品。然而，保持樣品溶劑強度小于初始流動相的強度仍然是重要的。
第四，使用體積更小，長度更短的管路。
第五，使用更小的流通池。
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