6
caspase-3抗體操作簡單，重復性好，效率高
caspase-3抗體是位于哺乳動物細胞凋亡通路下游關鍵的死亡蛋白酶。正常情況下，胞質中的Caspase-3以無活性的酶原形存在，細胞凋亡信號的出現可導致Caspase-3裂解、活化，活化的Caspase-3又進一步導致蛋白酶級聯切割放大，最終使細胞走向死亡。
因此Caspase-3表達量可以直接反映細胞凋亡程度。細胞凋亡程度Caspase-3是細胞凋亡過程中最關鍵的執行分子(keyexecutioner)之一，可以剪切細胞凋亡過程中的許多關鍵蛋白，例如PARP。
caspase-3抗體的激活需要從沒有活性的全長Caspase-3(35kD)，在Asp28和Ser29之間及Asp175和Ser176之間進行剪切，產生有活性的17kD肽段。Caspase-3抗體可以識別全長的Caspase-3(35kD)，也可以識別Caspase-3被剪切后產生的17kD片斷。未發現和其它Caspase家族蛋白有交叉反應。
Caspase-3抗體可用于制備AnnexinV-FITC細胞凋亡試劑盒。所述試劑盒包括：0.6-0.8%BSA的PBS緩沖液，2.5-4%多聚甲醛的PBS緩沖液，含0.6-0.8%Triton-X-100和0.06-0.08%吐溫40的PBS緩沖液，兔抗caspase-3抗體，帶有Alexa-Fluor488綠色熒光素標記的山羊抗兔IgG二抗，18-22μM-DAPI的PBS緩沖液。
所述兔抗caspase-3抗體是用合成的caspase-3蛋白中靠近Asp175的氨基末端殘基的多肽抗原免疫兔子獲得的多克隆抗體；兔抗caspase-3抗體按1:600的體積比稀釋于封閉液中。所述山羊抗兔IgG二抗按1:600的體積比稀釋于封閉液中；其中，所述封閉液為含10%山羊血清和0.06-0.08%吐溫40的PBS液。上述試劑盒能對凋亡細胞進行準確定性和定量檢測，靈敏度高、特異性強，操作簡單，重復性好，效率高。