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北京博奧森生物技術有限公司

如何選擇合適的HIS標簽抗體?這就來揭曉

時間:2022-11-23 閱讀:3013
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  His標簽抗體是由6個組氨酸(His-His-His-His-His-His)組成的短肽,專門設計用于重組蛋白質的吸附純化。由于分子量較小,并且較容易分離和純化,His-tag 融合標簽與其他標簽相比有很多明顯優勢, 是目前用于純化的融合標簽中使用最為廣泛的一種。His抗體可以用于檢測和His標簽融合表達蛋白的表達、細胞內定位,以及純化、定性或定量檢測His融合表達蛋白等。然而,目前商品化His-tag的單克隆抗體(mAb)種類不多, 且價格也十分昂貴。
  如何選擇合適的His標簽抗體
  我們在選擇His抗體時,主要根據自己的需要,特別是實驗應用上的需要。其中需要考慮的因素包括了,His抗體的應用檢測類型、His抗體的克隆性及制備來源等。比如該His抗體是否能用于Western Bloting的檢測?是否可以用于免疫熒光IF實驗?我是否需要特異性更好的單克隆His標簽抗體?我是否需要考慮下是選擇小鼠來源的還是兔來源的His抗體?
  一般來說,應用類型越多,在使用過程中的選擇余地就越大,而小鼠源的單克隆抗體一般在特異性、穩定性以及效價都要優于多克隆抗體。 另外,抗體的效價也是考察該抗體性價比的重要方面,也即相當于實際應用時的稀釋比率。一個效價高的100μl His抗體(假如其WB檢測的稀釋比率是1:5,000,最終使用液相當于500ml),要比效價低的1ml的His抗體(假如WB檢測的稀釋比率是 1:200,最終使用液相當于2ml)性價比更高。因此在選擇His標簽抗體的時候,不但需要考慮抗體的量,還需要考慮抗體的效價,即不同應用的建議稀釋比率。

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