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安捷倫科技(中國)有限公司

快速了解如何精準測試核酸熱解鏈溫度

時間:2022-3-31 閱讀:1277
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核酸研究  


在核酸研究領域,天然的功能核酸(如各種miRNA、IncRNA以及shRNA等)和人工篩選的功能核酸(如脫氧核酶、核酶及適配體等)不斷被發現或篩選出來。在基因功能研究、藥物發現、生物傳感器探針等領域的應用研究越來越多,尤其是核酸藥物(如反義核酸、小干擾RNA等)的陸續上市,使得核酸成為當前生命科學和藥物研究的熱點之一。而核酸的高級結構是其行使這些功能的物質基礎,因此高級結構的穩定性是核酸應用中需要考慮的至關重要的因素。對于核酸這類的較大的分子藥物,紫外光譜是研究其結構變化的可行且簡單的方法。  


核酸結構的特性  

1  核酸結構隨溫度的變化是可逆的,且不會使核酸變性。在一定的溶液條件下,一個核酸序列依賴氫鍵和靜電作用在低溫形成特定的高級結構,芳香性堿基發生堆積,產生減色效應,導致紫外吸收值降低。  

2  當溫度升高時,氫鍵和堿基堆積等弱相互作用被逐漸破壞,紫外吸收值逐漸升高。因此,配備溫度控制的紫外光譜儀非常適合研究核酸結構的穩定性。  

3  隨溫度的升高或者降低,當核酸的紫外吸收值達到高值的一半時,所對應的溫度被定義為核酸的熔點,用Tm表示。Tm的大小反應核酸結構的穩定性的高低。當Tm值越大,核酸的高級結構越穩定。  


基于以上特性,控溫型紫外光譜儀在核酸結構研究中能發揮獨一無二的作用。  

Cary3500UV-Vis分光光度計可搭配多種不同配置的控溫附件,并為核酸研究用戶帶來精準的測試結果。儀器采用了獨家的空冷控溫技術,升溫速率可以從0.1℃/min到40℃/min,不僅能夠分辨核酸高級結構變化中的多種形態,同時,一體化的附件設計理念也可避免傳統水控溫裝置繁雜的管線和工作噪聲。  


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本白皮書中系統的介紹了安捷倫帶控溫附件的Cary3500UV-Vis分光光度計在核酸Tm檢測應用中的完整解決方案。從樣品的前期處理到比色皿的選擇,從升溫速率的研究到測試過程中的注意事項,用戶都可在白皮書中找到相應的答案。  

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