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安捷倫科技(中國)有限公司

推“柱”之薦|配方顆粒色譜柱推薦之淡竹葉

時間:2022-7-19 閱讀:740
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在前幾期,我們重點為大家介紹并推薦了適用于中草藥檢測的各類安捷倫色譜柱,以便大家在日后的檢測工作中匹配使用。本期繼續帶來適用于淡竹葉配方顆粒檢測的色譜柱推薦,跟上我們,精彩繼續!



Agilent 在 2003 年首家推出了亞 2 微米粒徑的色譜柱,由此掀開了超高效液相色譜分離(UHPLC)的序幕。ZORBAX 系列的 UHPLC 色譜柱中,分為快速高通量分離(RRHT)和超高壓快速高分離度(RRHD)兩個系列,高壓力耐受分別為 600bar 和 1200bar。ZORBAX Plus C18 和 SB C18 RRHD 是中藥配方顆粒中常用 UHPLC 色譜柱。本實驗選用的色譜柱 ZORBAX Eclipse Plus C18 RRHD,其固定相表面通過致密鍵合和雙封端處理,對中藥中生物堿、皂苷、黃酮、萜類等成分具有優異的峰形和分離度。


根據國家藥品監督管理局 《國家藥品標準》中淡竹葉配方顆粒的檢測項目,對其特征譜圖和含量測定都采用 UHPLC 方法。特征譜圖測定中要求理論板數按異葒草苷峰計算應不低于 10000,供試品呈現的特征峰保留時間應與對照品相對應。含量測定中規定了理論板數按異葒草苷峰計算應不低于 10000。本文采用 1290 Infinity II 超高效液相色譜儀以及 ZORBAX Eclipse Plus C18 RRHD, 2.1x100mm, 1.8μm 色譜柱對淡竹葉配方顆粒的特征譜圖進行了分析,并對淡竹葉配方顆粒中異葒草苷的含量進行了測定。此外,我們也對該方法進行了加速,能夠實現更快速的分析。



1

特征譜圖


實驗結果


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圖1. 淡竹葉配方顆粒標準對照譜圖與替代方法中供試品特征譜圖(包括標準方法和加速方法)的比較 (峰 2(S):異葒草苷;峰 3:日當藥黃素)



色譜條件:


標準方法:


?

流動相:A:乙腈;B:H2O(0.2%磷酸)

?

梯度:0-4 min,95 %-92%B;4-25 min,92%B-85%B;25-30min,85-25 %B;后運行,7min

?

流速:0.25ml/min

?

柱溫:40 °C

?

檢測波長:350 nm(4nm), Ref: off; 采樣頻率:20Hz

?

進樣量:1 μL


加速方法:

?

梯度:24 min,95 %-92%B;2-12.5 min,92%B-85%B;12.5-15min,85-25 %B;后運行,3.5min

?

流速:0.5ml/min

?

其余同上。



系統適用性結果見下表:


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結果


1)使用 ZORBAX Eclipse Plus C18 柱,能準確定位標準中要求的 4 個特征峰,且相對保留時間(RRT)在標準要求范圍內。


2)標準方法和加速方法的理論板數按京異葒草苷峰計算分別為 124514 和 94893,大于規定值 10000,結果符合要求。


3) 使用加速方法加速分析后,分析結果符合標準要求,且分析時間縮短至原來的 50%。



2

含量測定


實驗結果


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圖2. 淡竹葉配方顆粒供試品含量測定標準方法和加速方法譜圖對照




色譜條件:


同特征圖譜標準方法和加速方法。


系統適用性結果見下表:


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結果


1)使用該方法測定異葒草苷的含量,其理論板數符合標準規定。


2)通過提高一倍流速,可加速分析方法,提高檢測效率(50% 時間節省)。


實驗結論

本實驗選用 ZORBAX Eclipse Plus C18 色譜柱對淡竹葉配方顆粒特征譜圖及含量進行了檢測,均符合標準要求。原方法流速較低(0.25ml/min),分析時間較長。通過提升流速,分析效率提高 1 倍,且相對保留時間、系統適應性試驗結果*要求

儀器系統及色譜柱推薦


1290 Infinity II 四元 UHPLC 系統:全能泵(G7104A),自動進樣器(G7129B),柱溫箱(G7116B),DAD(G7117A)

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其它詳細操作可以參考 Agilent 配方顆粒圖譜集,或聯系 Agilent。







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