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三角細胞搖瓶的相關制備流程

時間：2023/7/26閱讀：1564
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三角細胞搖瓶是一種常用的細胞培養(yǎng)耗材，主要用于各種懸浮細胞的培養(yǎng)，小容量的瓶子也可以用于培養(yǎng)基的制備或儲存。在培養(yǎng)CHO細胞時，就會用到這種耗材。
搖瓶種子制備流程如下：
1、培養(yǎng)基配制
搖瓶種子以培養(yǎng)具有強生長活性的營養(yǎng)菌體為目的，因而在配制培養(yǎng)基時必須全面、均衡地滿足菌體生長對各種營養(yǎng)物質(zhì)的要求，包括碳源、氮源、無機鹽、生長因子等。搖瓶種子在培養(yǎng)過程中不便于調(diào)節(jié)PH，因此在選擇培養(yǎng)基時要考慮培養(yǎng)過程中PH的穩(wěn)定，可以通過生理酸、堿性物質(zhì)的平衡搭配及加入磷酸鹽、碳酸鈣之類緩沖劑來實現(xiàn)。
2、接種
搖瓶種子的接種一般采用斜面種子挖塊法或米孢子粒計數(shù)接入法。這種接種方式難于掌握一致的接種量，可能會影響種子質(zhì)量的穩(wěn)定。對接種量敏感的菌種，盡量采用懸液接種法，即用無菌蒸餾水將斜面種子或米孢子粒上的細胞或孢子洗下，制成細胞或孢子懸液，然后按一定體積或一定細胞數(shù)接種至搖瓶種子培養(yǎng)基中。
3、培養(yǎng)
在恒溫室內(nèi)的搖床上進行培養(yǎng)，一般選用旋轉(zhuǎn)式搖床，這樣更利于培養(yǎng)時氣體交換。為了使細胞搖瓶中的水分蒸發(fā)量保持穩(wěn)定，恒溫室也應控制好濕度。

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