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前動力蛋白2(PK2)酶聯免疫吸附測定試劑盒

酶聯免疫吸附測定法

1971年瑞典學者Engvall和Perlmann,荷蘭學者Van Weerman和Schuurs分別報道將免疫技術發展為檢測體液中微量物質的固相免疫測定方法，即酶聯免疫吸附測定法 (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay , ELISA) 。ELISA已成為分析化學領域中的前沿課題 ，它是一種特殊的試劑分析方法，是在免疫酶技術( immunoenzymatic techniques ) 的基礎上發展起來的一種新型的免疫測定技術 。

中文名

酶聯免疫吸附測定法

外文名

Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay , ELISA

別名

ELISA法

發現者

Van Weerman

原理

抗體與酶復合物結合顯色

前動力蛋白2(PK2)酶聯免疫吸附測定試劑盒

試劑

（1）　包被緩沖液（PH9.60.05M碳酸鹽緩沖液）:

Na2CO3 1.59克

NaHCO3　 2.93克

加蒸餾水至1000ml

（2）　洗滌緩沖液（PH7.4PBS）：0.15M

KH2PO4 　0.2克

Na2HPO4·12H2O　2.9克

NaCl　8.0克

KCl　0.2克

Tween-20　0.05%　0.5ml

加蒸餾水至1000ml

（3）　稀釋液：

牛血清白蛋白（BSA） 0.1克

加洗滌緩沖液至100ml

或以羊血清、兔血清等血清與洗滌液配成5～10%使用。

（4）　終止液（3M　H2SO4）：

蒸餾水178.3ml，逐滴加入濃硫酸（98%）21.7ml。

（5）　底物緩沖液（PH5.0磷酸棗檸檬酸）:

0.2MNa2HPO4（28.4克/L）25.7ml

0.1M檸檬酸（19.2克/L）　 24.3ml

加蒸餾水50ml。

（6）　TMB（四甲基聯苯胺）使用液:

TMB（10mg/5ml無水乙醇）0.5ml

底物緩沖液（PH5.5）　 10ml

0.75%H2O2　 　32μl

（7）　ABTS使用液:

ABTS　0.5mg

底物緩沖液（PH5.5）　 1ml

3%H2O2　 　2μl

（8）　抗原、抗體和酶標記抗體。

（9）　正常人血清和陽性對照血清。

器材

（1）　聚苯乙烯塑料板（簡稱酶標板）40孔或96孔，ELISA檢測儀，50μl及100μl加樣器，塑料滴頭，小毛巾，洗滌瓶。

（2）　小燒杯、玻璃棒、試管、吸管和量筒等。

（3）　4℃冰箱，37℃孵育箱。