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細胞介紹
人食管癌細胞 (Eca-109)：1973 年建系，來自人食管中段鱗癌組織，小塊法原代培養建系。BALB/c 裸鼠移植成瘤。
細胞特性
1） 來源：食管癌
2） 形態：上皮細胞樣
3） 含量：>1x106 個/mL
4） 污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5） 規格：T25 瓶或者 1mL 凍存管包裝
運輸和保存：
使用含有優質胎牛血清的 2ml 凍存管發送存活細胞。收到細胞后， 可在 1000RPM，常溫條件下，離心 5min 后，于潔凈操作臺棄去上清，加入推薦使用的培養基后轉移至 10cm 培養皿或者 T25 培養瓶中培養，傳代達到細胞生長狀態良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。
細胞用途：僅供科研使用。細胞培養步驟
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備 RPMI-1640 培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號 21875-091)，90%；優質胎
牛血清，10%。
2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37 攝氏度，培養箱濕度為 70%-80%。
3） 凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。二． 細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入 4mL 培養基混合均勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 2ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4
分鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 到 1：5 的比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約 1ml 含血清的培養基后加入凍存管中，再添加 10%DMSO 后進行凍存。
注意事項：
1. 收到細胞后，若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯系。
2. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
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