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中文名稱:SP免疫組化檢測試劑盒(兔)
英文名稱:SP Kit(Rabbit)
SP免疫組化檢測試劑盒(兔)簡介
我公司提供的美國ZYMED公司SP系列試劑盒,全稱為過氧化物酶標記的鏈霉卵白素(Streptavidin/Peroxidase)染色試劑盒。該方法由美國ZYMED公司于1986年首建。由于鏈霉卵白素的分子量是60kDa。有四個亞基可和生物素結合,等電點為6.5,所以該方法具有靈敏度高、特異性強、背景清晰、成本低廉的優點,是理想的免疫組化染色方法。
試劑盒內容
試劑 (無色液體):3%H2O2去離子水 3ml
試劑A(藍色液體):封閉用正常山羊血清工作液 3ml
試劑B(黃色液體):生物素標記二抗工作液:生物素標記羊抗兔IgG 3ml
試劑C(橙色液體):辣根酶標記鏈霉卵白素工作液(S-A/HRP) 3ml
標本染色
1.石蠟切片,常規脫蠟至水。
2.蒸餾水沖洗,PBS浸泡5分鐘(如需采
3.用抗原修復,在此步驟后進行)。
3%H2O2 去離子水(無色液體)孵育15-20分鐘,以消除內源性過氧化物酶活性。
4.滴加試劑A(藍色液體)室溫孵育15-20 分鐘,傾去,勿洗
5.滴加適當比例稀釋的一抗,37℃孵育2-3小時或4℃過夜
6.PBS沖洗。3分鐘×3次
7.滴加試劑B(黃色液體),室溫或37℃ 孵育15-20分鐘
8.PBS沖洗,3分鐘×3次
9.滴加試劑C(橙色液體),室溫或37℃ 孵育15-20分鐘
10.PBS沖洗,3分鐘×3次
11.顯色劑顯色(DAB或AEC)
12.自來水充分沖洗
13.如果需要,可進行復染,脫水,透明
14.選擇適當的封片劑封片。
保存方法:2-8℃避光保存。
溫馨提示:
本系列檢測試劑盒適用于絕大數組織,但對于內源性生物素含量比較豐富的組織(如腎臟、肝臟等),應選用非生物素檢測系統,或用avdin封閉。
工作液:如以每張切片加入1滴(約50μl)計算,3ml可做60張切片,6ml可做120張切片。
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