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中文名稱：單細胞裂解液 (DNA型)
英文名稱：Single Cell Lysis Solution（DNA）
產品及特點
單細胞裂解液（DNA 專用）是單細胞DNA 提取專用裂解液，產品經過多次優化，含有多種去污劑、變性劑和鹽，可有效抑制核酸酶在裂解過程中對核酸的破壞，維持核酸的穩定性。單細胞裂解物可以直接用于測序和RT-PCR 等試驗。本產品足夠使用 200 次以上。
規格及成分
成 份 | 熱封袋包裝 |
單細胞裂解液（DNA 型） | 1 mL |
使用手冊 | 1 份 |
運輸及保存
低溫運輸，4℃保存，有效期一年。
自備試劑
PBS 溶液
使用方法
如何制備單個細胞取決于實驗樣品和實驗者所擁有的儀器設備，此處所列步驟僅針對培養細胞、實體組織、淋巴細胞和卵裂球（2-8 細胞胚胎）等材料，對其他材料（如干細胞克隆、胚囊、胚胎組織等），用戶需自行選用合適的方法制備單細胞。對已經處于單細胞懸浮狀態的細胞（如 FACS 分離細胞、卵細胞等），則可以跳過制備過程而直接進入單細胞裂解步驟：
一、用培養細胞或實體組織制備單細胞：
1. 按常規胰酶方法處理培養細胞或組織，將細胞重懸于自備的液體細胞培養基中。
2. 按常規方法對細胞進行計數。
3. 轉移 100-4000 個細胞到新離心管中，400 g 離心 4 分鐘沉淀細胞，小心棄上清（培養基）。
4. 將細胞沉淀重懸于 50 uL 自備的 PBS 溶液中，使其終濃度為 2-80 個細胞/uL。
5. 在干凈的培養皿上點加數個含 5 uL PBS 溶液的小液滴，加入 5 uL 細胞懸浮液到第一個小液滴中，然后再從第一個小液滴中轉移 5 uL 到第二個小液滴，如此系列稀釋樣品數次，使得其濃度接近每 2.5 uL 液體中含 1 個細胞，放冰上待用。
二、用卵裂球（blastomere，2-8 細胞胚胎）制備單個細胞：
6. 在培養皿中點數個含 5 uL 胚胎裂解液（需要從本公司另購）的小液滴。
顯微鏡下用微量注射液加入一個卵裂球到一個胚胎裂解液小液滴中。
8. 轉移幾次到后面的幾個液滴中以便將帶入的培養基稀釋掉。
9. 在最后一個液滴中，卵裂球的幾個細胞將彼此分開成單個細胞。
10. 取單個細胞，轉移到數個含 5 uL PBS 溶液的小液滴中洗滌掉胚胎裂解液。
11. 在顯微鏡下用顯微注射儀取只含一個細胞的 2.5 uL 樣品并轉移到一個200 uL 的PCR 管中待用。同時設置無樣品的陰性對照（2.5 uL 樣品中不含細胞）。
三、用單細胞裂解液裂解細胞
12. 在顯微鏡下用顯微注射儀取 2.5 uL 樣品，確認含一個細胞后，將其轉移到一個含 2.5 uL 單細胞裂解液的PCR 管中。最好同時設置無樣品的陰性對照（2.5 uL 樣品中不含細胞）。
13. 在 2.5 uL 樣品中，顯微鏡下細胞懸液可直接用于單細胞裂解反應。
14. 裂解后可以放冰上待用，如果長期不用，可以放-80℃保存。四、單細胞裂解物的PCR 擴增
15. 細胞裂解物從-80℃中取出后，65℃保溫 10 分鐘，取出后放冰上待用。
16. 以一半或全部上步操作得到的細胞裂解物為模板，按常規方法進行 PCR
反應。
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