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紫外可見分光光度法測定維生素B2含量

閱讀:5620        發(fā)布時(shí)間:2016-6-8

  紫外可見分光光度法測定維生素B2的方法步驟:

  1 待測液的配置:取待測片劑2片,精密稱定、研細(xì),精密稱取適量(約相當(dāng)于維生素B210 mg),置于1000 mL容量瓶中,加冰醋酸5mL與水100mL,置水浴(100 ℃)加熱1小時(shí),時(shí)時(shí)搖振,使維生素B2溶解,加水稀釋,冷卻后加氫氧化鈉液(1 mol/L30 mL。用水稀釋至刻度,搖勻,過濾;棄去初濾液,取續(xù)濾液作為待測液。

  2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配置:準(zhǔn)確稱取75mg核黃素(維生素B2),置于1000 mL容量瓶中,加少量水使維生素B2溶解,zui后加水定容至刻度得到維生素B2標(biāo)準(zhǔn)試劑(0.075 mg/mL)。

  3 用移液管分別吸取2mL4mL5mL6mL8mL維生素B2標(biāo)準(zhǔn)試劑(0.075 mg/mL 5個(gè)25 mL容量瓶中,  加水定容至刻度,搖勻。用紫外分光光度計(jì)分別測量5個(gè)容量瓶中的VB2稀釋液,得到5個(gè)吸收度數(shù)值A444nm

  4、以VB2稀釋液濃度為橫坐標(biāo),A444nm數(shù)值為縱坐標(biāo),建立VB2濃度與吸收度的標(biāo)準(zhǔn)曲線,然后在444nm波長處測出待測液的吸收度數(shù)值,在標(biāo)準(zhǔn)曲線上找到相應(yīng)的濃度數(shù)值即可。

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