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PureCube DIBMA–無去污劑法增溶膜蛋白
去垢劑（如SDS，n-辛基-β-d-葡萄糖苷(OG),n-十二烷-β-d-麥芽糖苷（DDM））被廣泛用于膜蛋白的提取，但不同去垢劑有著不同的缺點，例如短鏈非離子型去垢劑會影響膜蛋白的功能特性。幾乎可以確定的是如果將天然的磷脂雙分子層從膜蛋白中移除，膜蛋白的功能會受到影響。目前可通過MSP-nanodiscs（膜結構蛋白-納米磷脂盤）（圖一）或者無去污劑聚合物體系（圖二）（苯乙烯-馬來酸共聚物（SMAs）、二異丁烯-馬來酸(DIBMA)）來模擬天然磷脂雙分子層。使用后者可直接從細胞中提取膜蛋白，而無需任何去污劑增溶的中間步驟，因為這些合成聚合物能利用本身帶有的苯乙烯或馬來酸基團來增溶膜蛋白。
圖一.帶有目的蛋白的納米磷脂盤和膜結構蛋白（MSPs,綠色）。
圖二.帶有目的蛋白的合成聚合物例如SMA或DIBMA。
為何PureCube DIBMA比SMAs對蛋白增溶更具優勢呢？
SMAs相較于許多去垢劑來說有著巨大的優勢，并成功地被廣泛應用。但SMAs有一個缺點，即在溶解時對紫外線有較高吸光值，吸收波長為280nm。蛋白質因含有芳香族氨基酸（色氨酸和苯丙氨酸）而對紫外線在280nm有廣泛吸收，而SMAs也自帶一個芳香環，因此在使用SMAs對膜蛋白增溶、穩定和純化的過程中無法測定蛋白濃度。而選用德國庫柏生物的PureCube DIBMA能夠在不使用任何去污劑的情況下對膜蛋白進行增溶、穩定和純化并且*不影響蛋白濃度的測定。
圖3：從大腸桿菌中提取到的膜蛋白的SDS-PAGE圖。
使用了10 mM (0.5 % (w/v)) DDM和3 mM (2.5 % (w/v)) DIBMA。
圖4：二異丁烯-馬來酸（DIBMA）的化學結構式。
為何選擇德國庫柏生物公司的PureCube DIBMA?
我們提供高度純化且凍干的產品。除此之外，由于大多數蛋白增溶時最合適的pH值為7.5，PureCube DIBMA可用兩種緩沖液（HEPES或TRIS）凍干，以確保pH穩定在7.5。如果你需要用其他不同的緩沖液凍干PureCube DIBMA，請與我們聯系。根據樣品和需求的不同，可選擇中等長度10,000或12，000g/mol的DIBMA。
圖5：DIBMA溶解來自沉淀的蛋白質，上清液9000 xg和沉淀100000 xg。
使用不同濃度的DIBMA來確定合適的溶解條件。
特征：
用法 | 蛋白質溶解 |
分子質量 | ~12,000g / mol或10,000g / mol |
dn/dc（比折光指數增量） | 1.35 M-1 |
溶解度 | > 10％，溶于水 |
在280nm處的吸光度 | <0.3（1％溶液） |
Mg 2+耐受性 | 25 mM |
Ca 2+耐受性 | 20 mM |
參考文獻：
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