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細胞破壁的原理與注意事項是怎樣的

閱讀:2602      發(fā)布時間:2022-9-10
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   細胞破壁的原理:
  破壁后,細胞內(nèi)的水份油份遷出,使微粒子表面呈現(xiàn)出半濕潤狀態(tài),粒子和粒子之間會形成穩(wěn)定的粒子團,每個粒子團都包含相同比例的中藥成分。該粒子團的物理結(jié)構(gòu)隨組份中各成分HLB值(親水,親油平衡值)、延展性、破碎性、比重等不同組合和不同的相互作用而不同,這種結(jié)構(gòu)有利于人體對中藥的吸收和利用。
 
  細胞破壁的注意事項:
  1、確保具備足夠的初始材料,可以使用相同的試劑多次嘗試,因為可能需要調(diào)整條件。這對于利用酶法制備原生質(zhì)球尤為重要。
 
  2、為了得到活的原生質(zhì)體,起始物質(zhì)應該處于生命的全盛時期。所以選擇從幼嫩的植物組織開始,或者在生長的對數(shù)階段積極地進行細胞培養(yǎng)。非常年輕的組織通常很小,他們更容易受到傷害,這增加了他們在處理中可能無法存活的幾率。另一方面,老的組織不容易再生,更容易感染。
 
  3、在進行任何處理前將細胞冷卻并保持是很重要的,保持細胞低溫可以減緩壞死。但保持細胞溫度高于冰點也是至關(guān)重要的,因為即使是在介質(zhì)中短暫形成的冰晶也會損害細胞,減少產(chǎn)量。
 
  4、原生質(zhì)球?qū)C械壓力和滲透壓非常敏感。為了防止它們破裂,需要維持等滲條件,這意味著細胞內(nèi)外的滲透壓應該相等,滲透壓取決于鹽離子的濃度,不平等的壓力會導致細胞破裂(低滲溶液)或內(nèi)爆(高滲溶液)。
 
  5、即使是細胞的年齡和酶的批次之間的細微差別,也會形成不*的細胞壁消化和過度消化之間的對比,前者原生質(zhì)球產(chǎn)量為50%,后者導致大量死亡細胞。在大多數(shù)實驗中,不需要*移除細胞壁——部分移除細胞壁的原生質(zhì)球就可以了。

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